培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Tanaproget(NSP989)是新型非甾體孕酮受體激動(dòng)劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):304853-42-7 別名:NSP-989 純度:99.86% 分子量:297.37 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
活體半胱蛋白-7(CASPASE-7)活性原位熒光染色elisa試劑盒Human SPANXE ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli雜交瘤株;1B3
活體半胱蛋白-8(CASPASE-8)活性原位熒光染色elisa試劑盒Human SPA17 ELISA Kit拉丁屬名: Mucor bacilliformis雜交瘤株;5H3
活體半胱蛋白-9(CASPASE-9)活性原位熒光染色elisa試劑盒Human SLC29A1(EquilibRative nucleoside transporter 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus versicolor雜交瘤株;4G7
活體脘蛋白去糖基化試劑盒Human Spartin/SPG20 ELISA Kit規(guī)格: 凍干物雜交瘤株;5D1
活體線粒體長期跟蹤試劑盒Human SPACA3 ELISA Kit拉丁屬名: Sphingopyxis wooponensis雜交瘤株;DS2D3
活體線粒體跟蹤試劑盒Human SPAM1 ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter aerogenes雜交瘤株;macroglobulin-M-01
活體線粒體膜通道孔(MPTP)熒光elisa試劑盒Human SPACA1 ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas prosekii雜交瘤株;CD4-4D10
活體線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒Human SPAG11A ELISA Kit拉丁屬名: Paenisporosarcina macmurdoensis雜交瘤株;LZLPHZ
活體線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒Human SPANXA2/SPANXA1 ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用雜交瘤株;A6
活體線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒Human SPANXB1 ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis雜交瘤株;NZYT-ZJC
活體線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒Human SPANXC ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces globisporus雜交瘤株;IMI-G12
活體線粒體腫脹流式儀測定試劑盒Human SP6 ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用雜交瘤株;TWDB-WR-2
活體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位比色法定量elisa試劑盒(超氧陰離子)Human SPA17 ELISA Kit拉丁屬名: Isaria fumosorosea雜交瘤株;TWDB-WR-1
活體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位染色試劑盒(超氧陰離子)Human SPANXE ELISA Kit拉丁屬名: Valsa sordida Nitschke 雜交瘤株;5G2
活體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位熒光染色試劑盒(羥自由基)Human Spartin/SPG20 ELISA Kit拉丁屬名: Candida tropicalis雜交瘤株;4C8H9
活體組織蛋白B(CATHEPSIN B)活性原位熒光染色elisa試劑盒Human SLC29A1(EquilibRative nucleoside transporter 1) ELISA Kit拉丁屬名: Ruegeria atlantica雜交瘤株;3B6D6
人SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白1(SMOC1)免疫試劑盒腦表皮生長因子跨膜蛋白DNER抗體小鼠腎(Renin)ELISA試劑盒PH廣泛試紙
人SMAD3 免疫試劑盒DUX3蛋白抗體小鼠α2抗纖溶(α2-AP)ELISA試劑盒PH精密試紙
人SMAD2 免疫試劑盒死亡相關(guān)蛋白1抗體小鼠α2抗纖溶(α2-AP)ELISA試劑盒PH精密試紙
人SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒軸絲動(dòng)力蛋白重鏈9抗體小鼠α2纖溶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒PH精密試紙
非甾體孕酮受體激動(dòng)劑(Tanaproget)無基酵母氮源
其他 酵母氮源-無基
英文名稱: YNB
其他英文名稱: Yeast Nitrogen Base without Amino Acids
產(chǎn)品規(guī)格: BR
包裝:100克/1公斤/10公斤
級(jí)別:BR
Nitrogen source;
Ammonium sulfate:5.0g
Vitamius;
Biotin:2.0ug
Calcium pantothenate:400ug
Folic acid:2ug
Inositol:2000ug
Niacin:400ug
p-Aminobenzoic acid:200ug
Pyridoxine hydrochloride:400ug
Riboflavin:200ug
Thiamine hydrochloride:400ug
Compounds supplying trace elements;
Boric acid:500ug
Copper sulfate:40ug
Potassium iodide:100ug
Ferric chloride:200ug
Manganese sulfate:400ug
Sodium molybdate:200ug
Zinc sulfate:400ug
Salts;
Monopofassium phosphate:1g
Magnesium sulfate:0.5g
Sodium chloride:0.1g
Calcium chloride:0.1g
性狀:粉末。含硫胺?;c碳水化合物需求基礎(chǔ)上酵母分類
用途:生化研究。
保存:RT