培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
英文名稱:Navitoclax 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg Navitoclax是一種有效的Bcl-2抑制劑,對(duì)抗凋亡Bcl-2蛋白家族(包括Bcl-xL,Bcl-2和Bcl-w)具有高親和力,Ki值小于1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):923564-51-6 別名:ABT-263 純度:99.34% 分子量:974.61 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
凸臍儒孢菌CD20抗體Human HEV-IgM(hepatitis E virus-Immunoglobulin M) ELISA Kit人鋅指蛋白R(shí)IZ(PRDM2)免疫試劑盒
古布爾班克氏菌屬12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框40抗體Human SCRG1(Scrapie responsive protein 1) ELISA Kit人鋅指蛋白644(ZNF644)免疫試劑盒
鼠強(qiáng)對(duì)照液(乙乙酯介質(zhì))12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體Human alpha 1 microglobulin ELISA Kit人鋅α2糖蛋白(AZGP1)免疫試劑盒
瓜果腐霉11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體Human LAMTOR1(Ragulator complex protein LAMTOR1) ELISA Kit人心型脂肪結(jié)合蛋白(h-FABP)免疫試劑盒
粗糙艾美耳球蟲(chóng)11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框67抗體Human EZH2(Enhancer of zeste homolog 2) ELISA Kit人心肌營(yíng)養(yǎng)1(CT-1)免疫試劑盒
高盧蜜環(huán)菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體Human HBcAb(hepatitis B virus Core antibody) ELISA Kit人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒
玫瑰變紅鏈霉菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框16抗體Human PHF6(PHD finger protein 6) ELISA Kit人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)免疫試劑盒
云微所奇異球菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體Human HAV-IgM(hepatitis A virus-Immunoglobulin M) ELISA Kit人心肌肌球蛋白重鏈(MHC)自身抗體免疫試劑盒
芽孢桿菌屬11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體Human Cytochrome b-245 Beta Polypeptide ELISA Kit人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)免疫試劑盒
馬賽菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體Human NADPH oxidase 5 ELISA Kit人心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)免疫試劑盒
林地蘑菇11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體Human TRXR3(Thioredoxin reductase 3) ELISA Kit人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒
黑曲霉11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框65抗體Human PARK2(E3 ubiquitin-protein ligase parkin) ELISA Kit人協(xié)同激分子受體(CMR)免疫試劑盒
優(yōu)美氈被孔菌11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框71抗體Human MFN2(Mitofusin-2) ELISA Kit人小而密低密度脂蛋白(sLDL)免疫試劑盒
米根霉11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體Human NT-proCNP(N-Terminal Pro-C-Type Natriuretic Peptide) ELISA Kit人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)免疫試劑盒
大豆擬莖點(diǎn)霉12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框4抗體Human VDAC1(Voltage-dependent anion-selective channel protein 1) ELISA Kit人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)免疫試劑盒
乳桿菌屬12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體Human ASMA(Anti Smooth Muscle Antibody) ELISA Kit人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)免疫試劑盒
匍柄霉Stemphylium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREB病試劑盒根薯內(nèi)酯A
微小桿菌Microvirga│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREB病試劑盒骨化三
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis (Ehrenberg) Cohn 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRE3泛蛋白連接TRIM68試劑盒骨化二
Bcl-2抑制劑(Navitoclax)
英文名稱:PIPES
其他英文名稱:Piperazine-N,N-bis(2-ethanesulfonic acid);1,4-Piperazinebis(ethanesulfonic acid);Piperazine-1,4-bis(2-ethanesulfonic acid)
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:25克/100克/500克
CAS號(hào):5625-37-6
C8H18N2O6S2=302.37
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
重金屬:≤5ppm
水分:≤0.5%
紫外吸光度/280nm:≤0.05
性狀:粉末。PH6.1-7.5;pKa6.7-6.9(25℃),熔點(diǎn)>300℃
用途:生化研究。生物緩沖劑
保存:RT