操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):BtkBtk抑制劑(PCI-32765 Racemate)
英文名稱(chēng):PCI-32765 Racemate 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 PCI-32765(Ibrutinib)Racemate是PCI-32765的外消旋體。PCI-32765是Btk選擇性抑制劑,IC50為0.5nM,對(duì)Bmx,CSK,F(xiàn)GR,BRK,HCK有中度抑制性,但對(duì)EGFR,Yes,ErbB2,JAK3抑制性則較弱。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):936563-87-0 別名:Ibrutinib Racemate 純度:94.55% 分子量:440.5 儲(chǔ)存條件:-20℃避光,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
Ag11(蘑菇)Brevibacillus parabrevis豬磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)ELISA試劑盒
慢生根瘤菌Bacillus subtilis subsp. subtilis豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒
鏈霉菌Bacillus thuringiensis豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒
膠孢Bacillus thuringiensis豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒
三角孢小囊菌Bacillus thuringiensis豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型Bacillus thuringiensis豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)Bacillus thuringiensis豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
產(chǎn)朊假絲酵母Bacillus thuringiensis豬雌二受體(ER)ELISA試劑盒
草青霉Bacillus thuringiensis豬雌二受體(ER)ELISA試劑盒
堅(jiān)強(qiáng)芽胞桿菌Bacillus thuringiensis豬補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒
西伯利亞鏈孢囊菌Bacillus thuringiensis豬補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒
金針菇(毛柄金錢(qián)菌、冬菇)Bacillus thuringiensis豬骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒
細(xì)小微桿菌Bacillus thuringiensis豬骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒
檸條根瘤菌Bacillus thuringiensis豬腎上腺(EPI)ELISA試劑盒
謝瓦氏曲霉Bacillus thuringiensis豬腎上腺(EPI)ELISA試劑盒
球孢白僵菌Bacillus thuringiensis豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
SET易位蛋白/髓系白血病相關(guān)蛋白抗體奇異鏈霉菌牛布氏菌
腫瘤相關(guān)抑制劑1抗體梅久蘭鏈霉菌綿羊布氏菌
細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD5抗體金耳犬布魯氏菌
鈉離子通道β1抗體豬苓多孔菌問(wèn)號(hào)狀鉤端螺旋體
BtkBtk抑制劑(PCI-32765 Racemate)N,N-二乙基對(duì)二胺
其他 4-二乙基胺;對(duì)基-N,N-二乙胺;N,N-,4-二胺;對(duì)基-N,N-二乙基胺;二乙基-N,N-對(duì)二胺
英文名稱(chēng): 4-Amino-N,N-diethylaniline
其他英文名稱(chēng): N,N-Diethyl-p-phenylenediamine
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包 裝: 25克/100克
CAS號(hào):93-05-0
C10H16N2=164.25
級(jí)別:BR
含量:≥98%
熔點(diǎn):19~21℃
性狀:淺黃色油狀液體或深褐色至黑色粉末或液體。遇光或空氣極易變色。溶于乙和,不溶于水。相對(duì)密度 0.988。沸點(diǎn) 260~262℃。折光率(n20D)1.5710。有毒。有刺激性
用途:生化研究。照相顯影。染料中間體
保存:RT,避光