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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1409 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 患類風濕性關節(jié)炎病人的關節(jié)滑膜組織 | 種屬來源 | 人 |
詳細介紹
組織來源：患類風濕性關節(jié)炎病人的關節(jié)滑膜組織
種屬來源：人
細胞簡介：滑膜是關節(jié)囊的內(nèi)層，淡紅色， 平滑閃光，薄而柔潤，由疏松結締組織組成。關 節(jié)腔內(nèi)的所有結構， 除關節(jié)軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節(jié)腔的肌腱、韌 帶等均全部為滑膜所包裹?；し置诨?，在關節(jié)活動中起重要作用。正常滑膜 分為兩層， 即薄的細胞層(內(nèi)腔層)和血管層(內(nèi)膜下層)，是血管豐富的關節(jié)囊內(nèi)膜 ，貼附于非關節(jié)面部分， 覆蓋于關節(jié)囊內(nèi)的骨面上，不在軟骨面上，此部分稱為 邊緣區(qū)或“裸區(qū)"?；こ史奂t色， 光滑發(fā)亮、濕而潤滑，有時可見絨毛， 內(nèi)含 膠原性纖維。滑膜細胞有A、 B兩型。巨噬細胞樣A型細胞，表面有絲狀偽足、漿 膜內(nèi)陷、囊泡、線粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體， 具有吞噬功能； B型成纖 維樣滑膜細胞(FLS) ，有高濃度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結構， 是介導 RA 關節(jié)破壞的主要細胞。
培養(yǎng)基：原代成纖維細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)：成纖維樣細胞
傳代特性：細胞特性確定傳代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相： 空氣，95%；CO2 ，5%
一、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
人類風濕關節(jié)炎滑膜成纖維細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1409 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
人類風濕關節(jié)炎滑膜成纖維細胞是一種貼壁培養(yǎng)細胞，細胞形態(tài)呈成纖維樣細胞，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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大鼠陰道壁成纖維細胞 | 磷化細胞核因子重組兔單克隆抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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