產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
L189是一種新型人類DNA連接酶抑制劑,抑制hLigI/III/IV,IC50值分別為5/9/5μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):64232-83-3 分子量:246.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
短短芽孢桿菌Vibrio sp.
密叢毛霉Bacillus sp.
黏液桿菌屬Halobacillus sp.
山茶Bacillus firmus
酵母Vibrio proteolyticus
琉球曲霉Bacillus firmus
紅球菌Bacillus sp.
香菇Vibrio harveyi
球毛殼Vibrio harveyi
白粑齒菌Vibrio sp.
埃氏巨球形菌*Vibrio harveyi
污水德沃斯氏菌Halobacillus salinus
圍小叢殼菌Bacillus hwajinpoensis
葡萄座腔菌屬Bacillus hwajinpoensis
釀酒酵母Bacillus hwajinpoensis
灰樹花Bacillus sp.
豬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(AMH)免疫試劑盒腎上腺髓質(zhì)受體抗體人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒蟾靈
豬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒脂聯(lián)抗體人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒蟾它靈
豬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒腎上腺髓質(zhì)抗體人白介27(IL-27)ELISA試劑盒菖蒲
豬免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒腺苷受體A3抗體人白介27(IL-27)ELISA試劑盒長春
人類DNA連接酶抑制劑(L189)D-絲甲酯鹽鹽
英文名稱:D-Serine methyl ester hydrochloride
其他英文名稱:H-D-Ser-OMe.HCl
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:5克/25克/100克
CAS號(hào):5874-57-7
C4H9NO3•HCl=155.58
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
比旋光度:-4.5~-5.5°(C=2 in MeOH)
熔點(diǎn):163~165℃
性狀:結(jié)晶粉末
用途:生化研究
保存:RT
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。