詳細介紹
組織來源:外周血
種屬來源:人
細胞簡介:內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞,在生理或病理因素刺激下,可從骨髓動員到 外周血參與損傷血管的修復研究顯示,內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病 、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療 提供了新思路。
內皮祖細胞具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞,缺乏成熟內皮細 胞的特征性表型,不能形成管腔樣結構。其功能主要為參與了出生后缺血組織的 血管發(fā)生和血管損傷后的修復。
培養(yǎng)基:原代內皮祖細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài):長梭狀,不規(guī)則細胞
傳代特性:細胞特性確定傳代
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相: 空氣,95%;CO2 ,5%
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 商品貨號 |
人內皮祖細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1448 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
人內皮祖細胞是一種貼壁培養(yǎng)細胞,細胞形態(tài)呈長梭狀,不規(guī)則細胞,在技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內;
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品:
人乳腺上皮細胞 | 大鼠子宮頸上皮細胞 |
冠狀病毒2 Spike 蛋白中和抗體 | 陽離子轉運蛋白2單克隆抗體(工作液) |
大鼠支氣管平滑肌細胞 | D-DIMER單克隆抗體 |
大鼠支氣管上皮細胞 | β淀粉樣肽(1-42)單克隆抗體 |
大鼠脂肪干細胞 | 轉鐵蛋白受體(CD71)重組兔單克隆抗體 |
大鼠脂肪間充質干細胞 | 白細胞介1受體相關蛋白單克隆抗體 |
大鼠直腸平滑肌細胞 | 血管緊張轉換2抗體 |
大鼠終板軟骨細胞 | 熒光單克隆抗體 |
大鼠主動脈內皮細胞 | 嗅覺受體AI3重組兔單克隆抗體 |
大鼠主動脈平滑肌細胞 | 磷化原癌基因RAF1重組兔單克隆抗體 |
大鼠主動脈外膜成纖維細胞 | 冠狀病毒2核衣殼蛋白抗體 |
大鼠椎間盤髓核細胞 | 人內皮祖細胞磷化核因子κB抑制蛋白α重組兔單克隆抗體 |
大鼠椎間盤纖維環(huán)細胞 | 氯霉小鼠單抗 |
大鼠滋養(yǎng)層干細胞 | 組蛋白H1重組兔單克隆抗體 |
大鼠子宮成纖維細胞 | 干擾調節(jié)因子2重組兔單克隆抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。