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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1447 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 外周血 | 種屬來源 | 人 |
詳細(xì)介紹
組織來源：外周血
種屬來源：人
細(xì)胞簡介：自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell ， NK)是機體重要的免疫細(xì)胞 ，不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān) ，而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病 的發(fā)生。一種穩(wěn)定表達(dá)在NK和LAK細(xì)胞表面的LAK-1分子 ， 120kDa ， NK細(xì)胞在 IL-2條件下培養(yǎng)20天LAK-1仍為陽性 ，而HNK-1(CD57) 和CD16部分消失。 LAK 的殺傷活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。
自然殺傷細(xì)胞刺激因子 (natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 對NK細(xì)胞 有刺激作用。 IL-2、 IL-12、 IFN-α、TNF-α以及白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(leukoregulin,LR) 對NK細(xì)胞的活化和分化有正調(diào)節(jié)作用 ， 體外培養(yǎng)時加入上述細(xì)胞因子可明顯提 高NK的殺傷活性。前列腺素 (PG)E1、 E2、 D2和腎上腺皮質(zhì)激素等對NK細(xì)胞的 活性有抑制作用。
培養(yǎng)基：原代NK細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：懸浮培養(yǎng)
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性傳代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣 ，95%； CO2 ， 5%
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
人NK細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1447 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
人NK細(xì)胞是一種懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗。
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進(jìn)行包被，以增強細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 | 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 |
羰基還原1抗體 | 蛋白質(zhì)磷2A （alpha + beta）抗體 |
大鼠氣管平滑肌細(xì)胞 | CD68抗體 |
兔肌腱干細(xì)胞 | 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白2抗體 |
雞前脂肪細(xì)胞 | 干擾素-γ/IFN-γ抗體 |
人肺動脈成纖維細(xì)胞 | 磷化蛋白激C(T500)抗體 |
小鼠肺成纖維細(xì)胞 | 異質(zhì)核糖核蛋白K抗體 |
豬成骨細(xì)胞 | 小鼠抗人CD19單克隆抗體 |
大鼠肺成纖維細(xì)胞 | CD163抗體 |
兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 磷化真核翻譯起始因子4E抗體 |
雞外周血淋巴細(xì)胞 | TWIST蛋白抗體 |
人肺微血管平滑肌 | 人NK細(xì)胞磷化熱休克蛋白27抗體 |
小鼠支氣管上皮細(xì)胞 | 性磷樣蛋白2抗體 |
豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 | 前列腺素F2a受體抗體PGF2αR |
大鼠支氣管上皮細(xì)胞 | 補體應(yīng)答基因32抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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