詳細介紹
組織來源:腦組織
種屬來源:大鼠
細胞簡介:大鼠神經干細胞分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經干細胞具有分化為神經神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力,能自我更新,并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產生神經組織的各類細胞。需要強調的是,在腦脊髓等所有神經組織中,不同的神經干細胞類型產生的子代細胞種類不同,分布也不同。神經干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。神經干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,并向神經細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力,已成為神經系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩(wěn)定的神經干細胞培養(yǎng)模型是其基礎和臨床應用的前提。神經干細胞在培養(yǎng)3-4d后,可形成神經球,神經球在培養(yǎng)基:中呈懸浮生長,予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經球和單細胞懸液,將部分細胞接種到新的培養(yǎng)瓶中,2×105個細胞/瓶,每7-10d傳代1次,每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基:1次,培養(yǎng)條件:不變。
培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態(tài):球形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%胰dan白酶,Accutase
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
傳代比例:1:2
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 商品貨號 |
大鼠神經干細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1710 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
大鼠神經干細胞是一種懸浮細胞,細胞形態(tài)呈球形,在技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內;
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品:
大鼠腎皮質上皮細胞 | NCI-H716人結直腸腺癌細胞 |
成骨細胞特異性因子2重組兔單克隆抗體 | 癌癥/睪丸抗原1 抗體 |
NCI-H23人肺癌細胞 | 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體 |
NCI-H2452人間皮瘤細胞 | 周期T2抗體 |
NCI-H292人肺癌細胞(淋巴結轉移) | CDK5和ABL1底物1抗體 |
NCI-H295R人腎上腺皮質細腺癌細胞 | 維甲調節(jié)核基質相關蛋白抗體 |
NCI-H358人非小細胞肺癌細胞 | 趨化樣因子超家族成員5抗體 |
NCI-H3122人非小細胞肺癌細胞 | 磷相互作用結構域蛋白1抗體 |
NCI-H446人小細胞肺癌細胞 | 卷曲螺旋結構域蛋白56抗體 |
NCI-H460 [H460] 人大細胞肺癌細胞 | FRMD2蛋白抗體 |
NCI-H508人結腸直腸腺癌細胞 | 微管動力調節(jié)蛋白2抗體 |
NCI-H520人肺鱗癌細胞 | 大鼠神經干細胞腎病樣蛋白1抗體 |
NCI-H522 人非小細胞肺癌腺癌細胞 | 扁豆凝集抗體 |
NCI-H524人非小細胞肺癌細胞 | 沙門氏菌(多型)抗體 |
OCM 1A人眼膜絡黑色瘤細胞 | Ⅱ型膠原α1 N端前體肽抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。