大鼠腮腺細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品：小鼠胰島細(xì)胞大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞大鼠晶狀體上皮細(xì)胞大鼠精原干細(xì)胞大鼠口腔上皮細(xì)胞大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞大鼠卵巢成纖維細(xì)胞大鼠卵巢顆粒細(xì)胞大鼠卵巢上皮細(xì)胞大鼠卵泡膜細(xì)胞大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠腦成纖維細(xì)胞大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞

大鼠腮腺細(xì)胞

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：大鼠腮腺細(xì)胞分離自腮腺組織；腮腺是哺乳類動(dòng)物口腔中位于下頜角處的大唾液腺，位于外耳道的前下方，下頜后窩內(nèi)及下頜支的深面。腮腺也是某些無(wú)尾目動(dòng)物頸部有毒皮膚腺的聚集體；唾液腺有3對(duì)，腮腺、舌下腺和頜下腺，其中大的一對(duì)是腮腺。腮腺細(xì)胞是高度分化的上皮源性細(xì)胞，是一種營(yíng)養(yǎng)需要復(fù)雜、在一般合成培養(yǎng)基中不易生長(zhǎng)，體外培養(yǎng)比較困難。目前，DMEM培養(yǎng)液被認(rèn)為較適于腺細(xì)胞的培養(yǎng)。加入一定量的血清更有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖與分化。另外，接種的細(xì)胞密度也是培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素之一，尤其是在腺細(xì)胞這種單層細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，接種的細(xì)胞總數(shù)量和生長(zhǎng)基質(zhì)表面的細(xì)胞密度對(duì)整個(gè)細(xì)胞的生長(zhǎng)均有影響。
一、細(xì)胞基本屬性

原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：

取材--分離--培養(yǎng)--鑒定

首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。

實(shí)驗(yàn)步驟：

一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。

二、在超凈工作臺(tái)中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。

三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。

四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。

五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。

七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。

八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。

九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。

十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。

加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。

公司正在出售的產(chǎn)品：

注意事項(xiàng)：

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。