大鼠晶狀體上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：人子宮內(nèi)膜腺癌(轉(zhuǎn)移)細胞人胰腺細胞系人真皮成纖維母細胞豬小腸上皮細胞卡波西肉瘤細胞人正常子宮頸上皮細胞小鼠神經(jīng)干細胞丙二醛(MDA)ELISA試劑盒丙氨轉(zhuǎn)氨/谷丙轉(zhuǎn)氨(ALT/GPT)ELISA試劑盒別孕烯酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)ELISA試劑盒表皮細胞生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒表皮細胞活化肽因子(CAPF)ELIS

一、細胞基本屬性

 

組織來源：晶狀體組織

種屬來源：大鼠

細胞簡介：大鼠晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織；晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層，僅含有上皮細胞及其產(chǎn)物，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞分開；因而，晶狀體上皮細胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾，又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染，保證了培養(yǎng)中細胞成分的單一性。晶狀體上皮細胞主要負責調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡，包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中，晶狀體上皮細胞分化和成熟，然后遷移到晶狀體內(nèi)部，產(chǎn)生晶體蛋白，自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞，并終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明，晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控，包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形，呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細胞，其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關，體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

大鼠晶狀體上皮細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈上皮細胞樣，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

四、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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