化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×106 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1244 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 實(shí)驗(yàn)動物的正常骨髓血組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
詳細(xì)介紹
細(xì)胞詳述
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，對骨髓中的造血干細(xì)胞（HSC）不僅有機(jī)械支持作用，還能分泌多種生長因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）來支持造血。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells，BMSCs)具有多向分化潛能，能促進(jìn)間充質(zhì)組織的再生，如：骨、軟骨、肌肉、韌帶、肌腱、脂肪及基質(zhì)等組織。在骨髓中，BMSCs占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%~0.1%，含量極低。而同時，由于組織工程需要大量的種子細(xì)胞，從嚙齒類動物骨髓分離BMSCs的技術(shù)上的難度限制了許多實(shí)驗(yàn)的開展。體外分離培養(yǎng)純度高、活力強(qiáng)、生物特性均一的BMSCs對組織工程及細(xì)胞的體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)顯得至關(guān)重要。
該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。
注意事項(xiàng)： 收到細(xì)胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基，不能用來培養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1） 組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常骨髓血組織。
2） 細(xì)胞鑒定：CD44免疫熒光染色為陽性。
3） 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5） 細(xì)胞生長方式：長梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化 | 1×106 | A01X1244 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔軟骨細(xì)胞 | IEC-18大鼠回腸細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
短鏈脫氫/還原家族X抗體 | AF555標(biāo)記的基質(zhì)金屬蛋白-9抗體 |
A7r5大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的磷化Bcl-xL(Ser62)抗體 |
AR42J大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的組蛋白去乙?；?抗體 |
AR42J大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的磷化活化復(fù)制因子2抗體 |
BRL大鼠肝細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的醌氧化還原抗體 |
BRL大鼠肝細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族29成員3抗體 |
BRL-3A大鼠肝細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的線粒體核糖體蛋白L4抗體 |
BRL-3A大鼠肝細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體 |
C6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的HORMAD1蛋白抗體 |
C6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的多效性調(diào)節(jié)因子1抗體 |
C6+LUC大鼠腦膠質(zhì)瘤綠色熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化AF555標(biāo)記的CD2單克隆抗體 |
C6+LUC大鼠腦膠質(zhì)瘤綠色熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的晶狀體蛋白λ抗體 |
CBRH7919大鼠肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的驅(qū)動蛋白家族成員1C抗體 |
HSC-T6永生型大鼠肝儲脂細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | AF555標(biāo)記的p53結(jié)合蛋白1抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)