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大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)檢測試劑盒檢測前準備工作
閱讀:293 發(fā)布時間:2018-12-4大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)檢測試劑盒檢測前準備工作:
1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超過50℃,使用時洗滌液應(yīng)為室溫)。當日使用。
3. 標準品: 于10000×g離心1分鐘,加入標準品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標準品中,旋緊管蓋,靜置10分鐘,上下顛倒數(shù)次,待其充分溶解后,用移液器將其輕輕混勻(濃度為10ng/mL)。然后根據(jù)需要進行倍比稀釋(注:不要直接在反應(yīng)孔中進行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度:10、5、2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0ng/mL,標準品&樣品稀釋液直接作為空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL標準品:取0.5mL10ng/mL的上述標準品加入含有0.5mL標準品&樣品稀釋液的EP管中,混勻即可,其余濃度依此類推。
4. 生物素化抗體工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μL/孔計),實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。
5. 酶結(jié)合物工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μL/孔計),實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用前15分鐘,以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結(jié)合物(1:100)成工作濃度。當日使用。