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大鼠肝枯否細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:42:50瀏覽次數(shù):231

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肝臟組織
大鼠肝枯否細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:重組人白細(xì)胞介-4 細(xì)胞培養(yǎng)添加劑10ug重組人白介-13細(xì)胞培養(yǎng)添加劑10ug重組大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 VEGF 164細(xì)胞培養(yǎng)添加劑10ug人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子B3 細(xì)胞培養(yǎng)添加劑5ug人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子B3 細(xì)胞培養(yǎng)添加劑10ug

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。枯否氏細(xì)胞(Kupffer細(xì)胞)是肝臟的肝血竇內(nèi)一些固定于竇壁的巨噬細(xì)胞,它能吞噬和清除大部分從腸道來(lái)的抗原微粒,并能吞噬和清除肝血竇中的細(xì)菌、異物和衰老的紅細(xì)胞,并把血紅蛋白分解成。此外,肝巨噬細(xì)胞也有處理抗原,誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖,參與免疫調(diào)節(jié)的作用??莘袷霞?xì)胞和一般巨噬細(xì)胞不同,枯否氏細(xì)胞不具有增加抗原免疫原性的能力,相反有消除或減弱抗原性的作用??莘袷霞?xì)胞能吞噬來(lái)自血液循環(huán)的抗原抗體復(fù)合物和其他有害物質(zhì),以消除這些物質(zhì)對(duì)機(jī)體的損害??莘窦?xì)胞功能障礙可導(dǎo)致腸源性內(nèi)毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、巨噬細(xì)胞

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  (12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠肝枯否細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肝臟組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

MCCC1蛋白抗體 肝羧酯1封閉多肽 

ODR4蛋白抗體 中心體蛋白CEP120封閉多肽 

Src激活和信號(hào)分子蛋白抗體 FOXI2蛋白封閉多肽 

FRZB蛋白抗體 白介17受體封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體 緊密連接蛋白17封閉多肽 

溶質(zhì)載體家族蛋白13成員A3抗體 磷化磷脂酰肌醇激催化亞單位D封閉多肽 

體激活因子PA28γ抗體 磷化BCL10封閉多肽 

端粒調(diào)控因子抗體 細(xì)胞表面趨化因子受體4封閉多肽 

腫瘤相關(guān)抗原L6抗體 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈封閉多肽 

KMT2H蛋白抗體 染色質(zhì)解旋DNA結(jié)合蛋白2封閉多肽 

RNA結(jié)合蛋白R(shí)BED1抗體 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白FIG4封閉多肽 

三磷肌醇3激A抗體 濾泡樹突細(xì)胞分泌蛋白封閉多肽 

原癌基因M-ras抗體?、笮屠w維連接蛋白域蛋白4封閉多肽 

轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體 5號(hào)染色體開放閱讀框35封閉多肽 

英文名稱: Chloramphenicol 同源盒蛋白HOXD10封閉多肽 

4-羥基苯氧化抗體 叉頭蛋白N1封閉多肽 

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體 SHKBP1蛋白封閉多肽 

叉頭蛋白I1抗體 細(xì)胞色P450 24A1封閉多肽 
大鼠肝枯否細(xì)胞DMEM/F12無(wú)糖 (含L-丙氨酰-L-)500mL-

BGJb(Fitton-Jackson改良)500mL-

Acc-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4Acc-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持Acc-2細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Acc-2細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于Acc-2細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖培養(yǎng)基(含10%FBS)125mL×4Dulbecco's改良培養(yǎng)基——DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基的含量增加了2倍,維生增加了4倍,同時(shí)還增加了非必須氨基、微量鐵離子以及鈉。DMEM培養(yǎng)基初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來(lái)又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。

OKT 3細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4OKT 3細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持OKT 3細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含OKT 3細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于OKT 3細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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