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大鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:09:06瀏覽次數(shù):256

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 三叉神經(jīng)組織
大鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞 原代細(xì)胞5×105大鼠晶狀體上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠結(jié)膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自三叉神經(jīng)組織;三叉神經(jīng)為粗大的混合性腦神經(jīng),含一般軀體感覺(jué)和特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)兩種纖維。其特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)纖維起于腦橋中段的三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核,纖維組成三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺(jué)根下內(nèi)側(cè),后進(jìn)入三叉神經(jīng)第3支下頜神經(jīng)中,經(jīng)卵圓孔出顱,隨下頜神經(jīng)分支分布于咀嚼肌等。運(yùn)動(dòng)根內(nèi)還含有三叉神經(jīng)中腦核有關(guān)的纖維,主要傳導(dǎo)咀嚼肌的本體感覺(jué)。三叉神經(jīng)內(nèi)以軀體感覺(jué)神經(jīng)纖維為主,這些纖維的細(xì)胞體位于三叉神經(jīng)節(jié)(半月節(jié))內(nèi),該神經(jīng)節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經(jīng)壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經(jīng)節(jié)由假單極神經(jīng)元組成,其中樞突集中構(gòu)成了粗大的三叉神經(jīng)感覺(jué)根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦,止于三叉神經(jīng)諸感覺(jué)核,其中傳導(dǎo)痛溫覺(jué)的纖維主要終止于三叉神經(jīng)脊束核;傳導(dǎo)觸覺(jué)的纖維主要終止于三叉神經(jīng)腦橋核。三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的周?chē)唤M成三叉神經(jīng)三大分支,即第1支眼神經(jīng)、第2支上頜神經(jīng)、第3支為下頜神經(jīng)。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內(nèi)、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等,傳導(dǎo)痛、溫、觸等多種感覺(jué)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白消化法結(jié)合神經(jīng)元專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  0.125%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

三叉神經(jīng)組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

視黃受體應(yīng)答蛋白1抗體 轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NK2封閉多肽 

足細(xì)胞特異蛋白抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白39成員A14封閉多肽 

富含亮氨重復(fù)蛋白63抗體 轉(zhuǎn)胺3封閉多肽 

泛蛋白連接2N抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白6封閉多肽 

磷化內(nèi)收蛋白抗體 載脂蛋白J封閉多肽 

鋅指蛋白165抗體 ENOX2蛋白封閉多肽 

伸長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體 重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子蛋白 

卡因和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白抗體 ZC3H11A蛋白封閉多肽 

細(xì)胞膜調(diào)控蛋白Paralemmin 1抗體 胰島β細(xì)胞生長(zhǎng)因子封閉多肽 

角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體 25羥化封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激MNB抗體 V組和跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白5封閉多肽 

磷化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體 原鈣粘蛋白β2封閉多肽 

BRD2蛋白抗體 熱休克蛋白70家族蛋白6封閉多肽 

富含亮氨重復(fù)蛋白25抗體 JAK和微管相互作用蛋白2/JAK和微管相互作用蛋白2封閉多肽 

磷化絲氨/蘇氨蛋白激抗體 SAMD3蛋白封閉多肽 

乳腺癌易感基因2相互作用蛋白抗體 結(jié)蛋白封閉多肽 

Kelch樣蛋白38抗體 巢蛋白/神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白封閉多肽 

水通道蛋白8抗體 緊密連接蛋白8封閉多肽 
大鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞離心管英文名稱(chēng):離心管15ml

1.8ml細(xì)胞凍存管英文名稱(chēng):1.8ml細(xì)胞凍存管50個(gè)

細(xì)胞刮 鏟刀英文名稱(chēng):細(xì)胞刮 鏟刀1支

一次性無(wú)菌移液管英文名稱(chēng):一次性無(wú)菌移液管5ml

一次性無(wú)菌移液管英文名稱(chēng):一次性無(wú)菌移液管10ml

一次性無(wú)菌移液管英文名稱(chēng):一次性無(wú)菌移液管25ml

細(xì)胞培養(yǎng)瓶英文名稱(chēng):細(xì)胞培養(yǎng)瓶20個(gè)
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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