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大鼠心臟纖維原細胞

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更新時間:2023-04-23 10:06:19瀏覽次數(shù):251

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 心臟組織
大鼠心臟纖維原細胞的相關產品:HPAC (人胰腺腺泡上皮癌)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠牙髓干細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶人鞏膜成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶Vero (非洲綠猴腎細胞)(種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶Pt K1 [NBL-3] (袋鼠腎細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形,胞質較少,弱嗜suan性,胞核小,染色深。電鏡下可見,細胞中粗面內質網和高爾基體均不發(fā)達。當組織受損時,纖維細胞可轉化為成纖維細胞而參與修復過程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細胞,如在組織損傷后的修復過程中,纖維細胞可轉化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小,呈多角形,胞質較少,弱嗜suan性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內質網較少,高爾基復合體不發(fā)達。成纖維細胞較大,呈星形或梭形,有突起,細胞核呈卵圓形,染色質稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網狀纖維以及基質成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成,當心肌損傷時能產生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中常見的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維及有機基質,并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉變?yōu)橛字傻某衫w維細胞,其功能活動也得以恢復,參與組織損傷后的修復。因此,對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現(xiàn)代心血管領域研究的一個重點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化結合差速貼壁法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠心臟纖維原細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

心臟組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

ATP依賴解旋DDX24抗體 膽囊收縮39封閉多肽 

TRNA-YW 合成蛋白 5抗體 A型流感病毒蛋白PA-X封閉多肽 

催乳調節(jié)元件結合蛋白PREB抗體 激上調神經腫瘤相關激封閉多肽 

磷化活化轉錄因子1抗體 熱休克因子蛋白4封閉多肽 

角蛋白KRT83抗體 重組人MUC16 蛋白 

α輔助因子44抗體 癌/睪丸抗原113封閉多肽 

HHLA3蛋白抗體 黃曲霉毒B1血藍蛋白偶聯(lián)物 

激肽釋放8抗體 B淋巴細胞白血病前體蛋白轉錄因子3封閉多肽 

組蛋白H2家族A.V抗體 BMP內皮細胞調節(jié)蛋白封閉多肽 

甲胎蛋白單克隆抗體(檢測) 磷化肌細胞特異性增強因子2D封閉多肽 

DNA1樣蛋白1抗體 生長分化因子9封閉多肽 

1號染色體開放閱讀框21抗體 甲基化組蛋白H3(mono methyl K79)封閉多肽 

TBC結構域家族D12蛋白抗體 鈣粘蛋白15封閉多肽 

ATP依賴的干擾反應蛋白1抗體 活化B淋巴細胞因子1封閉多肽 

細胞周期后期促進蛋白亞基10抗體 多藥耐藥相關蛋白3封閉多肽 

即刻早期應答基因5樣蛋白抗體 整合αM封閉多肽 

過敏毒C4/補體C4抗體 腫瘤抗原CML66封閉多肽 

腫瘤壞死因子配體超家族成員4抗體 B淋巴細胞白血病前體蛋白轉錄因子4封閉多肽 
大鼠心臟纖維原細胞DMEM低糖(含HEPES)500mL-

MEM無糖 (含NEAA,不含L-、酚紅)500mL-

V79細胞專用培養(yǎng)基125mL×4V79細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持V79細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含V79細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于V79細胞的體外培養(yǎng)。

兔肌腱干細胞培養(yǎng)基100mL兔肌腱干細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持兔肌腱干細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含兔肌腱干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔肌腱干細胞的體外培養(yǎng)。

NCI-H1395細胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H1395細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持NCI-H1395細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含NCI-H1395細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H1395細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠小腸Cajal間質細胞培養(yǎng)基100mL大鼠小腸Cajal間質細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持大鼠小腸Cajal間質細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠小腸Cajal間質細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠小腸Cajal間質細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠嗅球神經元細胞培養(yǎng)基100mL小鼠嗅球神經元細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持小鼠嗅球神經元細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含小鼠嗅球神經元細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠嗅球神經元細胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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