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大鼠腦動脈血管平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 16:06:41瀏覽次數(shù):226

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦動脈組織
大鼠腦動脈血管平滑肌細胞的相關產品:大鼠淋巴管成纖維細胞原代細胞5×105大鼠骨髓肥大細胞原代細胞5×105大鼠骨髓單核細胞原代細胞5×105大鼠脾淋巴細胞原代細胞5×105大鼠骨髓巨噬細胞原代細胞5×105

詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠腦動脈血管平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

腦動脈組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腦動脈組織;腦動脈有成對的頸內動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán);靜脈系多不與同名動脈拌行,所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內靜脈;各級靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

英文名稱: mTOR 重組人神經絲蛋白 

英文名稱: BANF1 心臟和神經嵴衍生蛋白2封閉多肽 

G蛋白信號調節(jié)蛋白2抗體 ATP依賴RNA解旋DDX41封閉多肽 

肌球蛋白磷抗體 磷化KB抑制蛋白激α/IKK α 封閉多肽 

血清反應因子輔助蛋白SAP2抗體 重組SARS病毒的衣殼蛋白 

抑癌基因p16抗體 重組小鼠缺氧誘導蛋白HIG1蛋白 

蛋白激C亞型PKCI抗體 四度跨膜蛋白3封閉多肽 

B Raf抗體 缺氧誘導因子脯氨酰4羥化封閉多肽 

嗜乳脂蛋白樣3抗體 58K高爾基蛋白封閉多肽 

基質重塑相關蛋白5抗體 核苷結合蛋白9封閉多肽 

跨膜TMIGD1蛋白抗體 氧化還原GlyR1/核蛋白60封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 干擾kappa蛋白封閉多肽 

B淋巴細胞白血病/淋巴瘤11B抗體 白介33封閉多肽 

磷脂重塑基因SERAC1抗體 神經細胞凋亡抑制蛋白封閉多肽 

磷化DNA拓普西異構Ⅱ抗體 線粒體核糖體蛋白S9封閉多肽 

磷脂磷LPIN3抗體 SEC13蛋白封閉多肽 

8號染色體開放閱讀框42抗體 EFHA2蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白503抗體 PTRHD1蛋白封閉多肽 
大鼠腦動脈血管平滑肌細胞人白細胞介IL-6英文名稱:(IL-6)重組蛋白10ug

人白細胞介IL-6英文名稱:(IL-6)重組蛋白50ug

人白細胞介10英文名稱:(IL-10)重組蛋白5ug

人白細胞介10英文名稱:(IL-10)重組蛋白10ug

人白細胞介10英文名稱:(IL-10)重組蛋白50ug

人白細胞介8英文名稱:(IL-8)重組蛋白5ug

人白細胞介8英文名稱:(IL-8)重組蛋白10ug


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