我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
產(chǎn)品名稱:碳酸氫鈉細(xì)胞
英文名稱:NaHCO3
貨號(hào):BJ-01X10041
規(guī)格:100ml
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬凝血敏感蛋白1(TSP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒癸乙酯乙苯汞 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)氟化鋁 99.9% metals basis
豬抗補(bǔ)體1q抗體(C1q-Ab)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 癸乙酯2,4,6-三(二氨)苯酚 95%氟鋁銨 98%
豬Dickkopf相關(guān)蛋白1 (DKK1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒三叔丁氧氫化鋁鋰 97%乙鈷,四水 99.9% metals basis
豬S100鈣結(jié)合蛋白A7 (S100A7)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 氫化鋰 95%硫鈷,七水 AR,99.5%
豬胱天蛋白激活的脫氧核糖核(CAD)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 氫化鋰 2.0M四溶液硫鈷,七水 99.99% metals basis
豬質(zhì)衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒苯氧乙三仲丁氫化鋰 1M THF溶液式碳鎳 AR
豬絨毛蛋白(CVL/EZR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 苯氧乙三叔丁氧氫化鋁鋰 1.0 M in THF鄰苯二酰亞 99%
豬層粘蛋白(LN)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒苯氧乙綠原 95%1,3,5-三苯 CP,97%
豬信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5A(STAT5A)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒高嶺土羥檸檬 95%1,2,4-三苯 98%
豬磷脂酰肌蛋白聚糖2(GPC2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 靛玉紅穿心蓮內(nèi)酯 98%氫氧化 電子級(jí), 99.99% metals basis,鈉除外
豬白分化抗原30配體(CD30L)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 靛玉紅穿心蓮內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品氫氧化 電子級(jí),99.999% metals basis,鈉除外
豬肺耐藥蛋白(LRP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吡唑鹽小檗 98%氫氧化鈉 Ph. Eur., BP, NF, E524, 98-100.5%, pellets
豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吡唑磷鎢 AR化 AR,≥99.0%
豬核RNA輸出因子1(NXF1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吡唑4-(硫)苯酚 98%化 ≥99.99% metals basis
豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 戊二酐吡-2,3-二羧 97%化 ACS, ≥99.0%
豬碳酐XII(CA12)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒戊二酐γ-環(huán)糊精 98%硫化銨溶液 ACS,22.0-24.0%
碳酸氫鈉細(xì)胞環(huán)指蛋白157抗體1-(4-氨丁)胍硫鹽 AGMATINE SULFATE SALT(P)Human, Mouse, Rat
核糖核抑制因子1抗體 G2 AFLATOXIN G2(RG)Human, Mouse
Notch轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白R(shí)BPJK抗體 G2 AFLATOXIN G2(RG)Human, Mouse
鈣調(diào)神經(jīng)磷調(diào)節(jié)蛋白2抗體(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白2) G1 AFLATOXIN G1(RG)Human, Mouse
環(huán)指蛋白5抗體(E3泛素蛋白連接RNF5) G1 AFLATOXIN G1(RG)Human, Mouse
核糖體蛋白L15抗體 B2 AFLATOXIN B2(RG)Human, Mouse, Rat
視黃結(jié)合蛋白1抗體 B2 AFLATOXIN B2(RG)Human, Mouse, Rat
視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白6抗體 B1 AFLATOXIN B1(RG)Human, Mouse, Rat
核糖體結(jié)合蛋白1抗體 B1 AFLATOXIN B1(RG)Human, Mouse
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。