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人肝星狀細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:47:02瀏覽次數(shù):221

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肝臟組織
人肝星狀細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:細(xì)菌清除劑 2000x 細(xì)胞培養(yǎng)添加劑2 mL支原體PCR檢測(cè)試劑盒,20 次細(xì)胞培養(yǎng)添加劑20 Rxns支原體PCR檢測(cè)試劑盒,50 次細(xì)胞培養(yǎng)添加劑50 Rxns支原體PCR檢測(cè)試劑盒,100 次細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100T Rxns細(xì)胞培養(yǎng)箱水盤除菌劑,100 ×細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100 mL

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細(xì)胞(HSC)又名肝貯脂細(xì)胞、維生素A貯存細(xì)胞、竇周細(xì)胞、Ito細(xì)胞等,是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)源。HSC在激活后可進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細(xì)胞。正常情況下,HSC處于靜止?fàn)顟B(tài),當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機(jī)械刺激等損傷時(shí),HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚停せ畹腍SC可通過(guò)增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建,此過(guò)程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細(xì)胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi),是合成、分泌細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)源,在肝纖維化的發(fā)生中處于重要地位。肝星形細(xì)胞是肝臟*的間充質(zhì)細(xì)胞,約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細(xì)胞外基質(zhì)的主要細(xì)胞群,肝星形細(xì)胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,合成一定量的膠原以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu),還能通過(guò)其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外,肝星形細(xì)胞能通過(guò)合成肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子等促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和肝再生。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

人肝星狀細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肝臟組織

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

跨膜蛋白28/TMEM28抗體 含賴氨卷曲螺旋蛋白1封閉多肽 

尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子4抗體 重組人Bax蛋白 

細(xì)胞色P450 7A1抗體/7a羥化抗體 嗅覺(jué)受體52D1封閉多肽 

磷化著絲粒蛋白A 生長(zhǎng)激釋放激封閉多肽 

心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 跨膜蛋白SEMA5B封閉多肽 

氨肽Q抗體 細(xì)胞間粘附分子4封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 磷化細(xì)胞核因子NF-κB p65封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激PCTK2抗體 畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1封閉多肽 

賴氨,天冬氨,谷氨,亮氨相關(guān)序列抗體 程序性死亡1封閉多肽 

組蛋白精氨甲基轉(zhuǎn)移5抗體 絲氨甲基化cSHMT封閉多肽 

神經(jīng)肽NPSF抗體 上皮細(xì)胞膜蛋白2封閉多肽 

凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15樣蛋白抗體 γ氨基丁運(yùn)載蛋白2封閉多肽 

甲基轉(zhuǎn)移樣蛋白10抗體 胎盤特異基因8蛋白封閉多肽 

LMO7蛋白抗體 10封閉多肽 

二磷核苷激7抗體 FLJ39378蛋白封閉多肽 

ZCWCC1抗體 角化蛋白S100A18封閉多肽 

富亮氨重復(fù)激2單克隆抗體 平滑肌蛋白3封閉多肽 

6號(hào)染色體開放閱讀框120抗體 蛋白激A受體2α亞基封閉多肽 
人肝星狀細(xì)胞IMDM(不含L-)500mL-

PA319細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4PA319細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持PA319細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含PA319細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于PA319細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠腎成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠腎成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠腎成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠胰島β細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠胰島β細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠胰島β細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠胰島β細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠胰島β細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠腎小球上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠腎小球上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠腎小球上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠腎小球上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠腎小球上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

BT-549細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4BT-549細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持BT-549細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含BT-549細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于BT-549細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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