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豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:53:33瀏覽次數(shù):279

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 脂肪組織
豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠胸腺上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠胰島細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠小腸平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠膀胱成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

脂肪組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪suan,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細(xì)胞群,具有自我更新能力和多向分化潛能,被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞,簡稱脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞。與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相比,在來源、細(xì)胞群特點(diǎn)以及分化潛能等多方面極為相似。但是,脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞更易獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞,且獲取過程中對機(jī)體損傷更小,是更為理想的自體干細(xì)胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞以梭形為主要形態(tài),BrdU可標(biāo)記其細(xì)胞核。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鋅指蛋白695抗體 GTSF1L蛋白封閉多肽 

磷化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體 KLF樣轉(zhuǎn)錄因子7封閉多肽 

磷化細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激2抗體 1號染色體開放閱讀框131封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 一氧化氮合成-2(誘導(dǎo)型)封閉多肽 

腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體 轉(zhuǎn)錄因子E2F-5封閉多肽 

環(huán)核苷門控陽離子通道蛋白CNG-1β抗體 泛特異性SENP7封閉多肽 

JAGN1蛋白抗體 GADD45γ相互作用蛋白1封閉多肽 

前列腺癌抑癌蛋白3抗體 4號染色體開放閱讀款 

乳腺癌易感基因復(fù)合物HSPC142抗體 24羥化封閉多肽 

-糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗體 絲氨/蘇氨激作用蛋白11封閉多肽 

驅(qū)動蛋白KIF5A抗體 癌基因c-Raf封閉多肽 

磷化纖維束蛋白同源物1抗體 細(xì)胞凋亡水解樣蛋白1封閉多肽 

線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子樣蛋白MTERFD3抗體 HERC3 E3泛蛋白連接封閉多肽 

20號染色體開放閱讀框4抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白20成員A1封閉多肽 

腎上腺髓質(zhì)抗體(N端20肽) 脆性X相關(guān)蛋白樣2封閉多肽 

PE標(biāo)記小鼠抗人CD22單克隆抗體 重組人CTLA4蛋白 

絲氨水解樣蛋白2抗體 CTDSPL蛋白封閉多肽 

磷化HER2受體抗體 重組H5N6-NA蛋白 
豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞AN3 CA (人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

MIA PaCa-2 (人胰腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)DMEM+10%FBS+2.5%HS+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

MDA-MB-231/GFP (人乳腺癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記) (L15) (STR鑒定正確)Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

CNE-2Z (人鼻咽癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系,)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

MET-5A (人間皮細(xì)胞) (STR鑒定正確)M199+10% FBS+ ITS+3.3 nM EGF+400 nM hydrocortisone+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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