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大鼠前列腺成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:21:05瀏覽次數(shù):263

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 前列腺
大鼠前列腺成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:原代平滑肌細(xì)胞低血清培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代平滑肌細(xì)胞低血清培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性*的性腺器官;前列腺是不成對的實(shí)質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時(shí),排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構(gòu)成精液主要成分;作為內(nèi)分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的前列腺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠前列腺成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

前列腺

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

腱糖蛋白R抗體 富含亮氨重復(fù)序列蛋白1封閉多肽 

磷化MCM2蛋白抗體 FAM188B2蛋白封閉多肽 

MID1相互作用蛋白1抗體 細(xì)胞周期蛋白依賴性激調(diào)節(jié)亞基1封閉多肽 

p53結(jié)合蛋白3抗體 磷化原癌基因蛋白c-kit封閉多肽 

英文名稱: ERG 插入QTRT1封閉多肽 

活化B淋巴細(xì)胞因子1抗體 肌球蛋白輕鏈激2封閉多肽 

線粒體導(dǎo)肽水解β抗體 磷化突觸融合蛋白1(Ser14)封閉多肽 

雙同源盒蛋白1抗體 線粒體核糖體蛋白L38封閉多肽 

英文名稱: SARS-CoV-2 () Nucleocapsid 蓬亂蛋白1封閉多肽 

SEL1L3蛋白抗體 皮層蛋白結(jié)合蛋白2封閉多肽 

干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8抗體 磷化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3封閉多肽 

巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體 驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員6封閉多肽 

嗅覺受體5W2抗體 肌動(dòng)蛋白γ1封閉多肽 

外致密纖維蛋白3B抗體 脂質(zhì)磷磷相關(guān)蛋白1/可塑性相關(guān)基因3封閉多肽 

白細(xì)胞抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體 溶血磷脂酰酰基轉(zhuǎn)移1封閉多肽 

突觸融合結(jié)合蛋白6抗體 葡萄糖合成2封閉多肽 

ras癌基因家族Rab11蛋白抗體 T淋巴細(xì)胞受體相互作用分子封閉多肽 

DNA依賴蛋白激催化亞基抗體 碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6-A15封閉多肽 
大鼠前列腺成纖維細(xì)胞人臍帶血單核細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人臍帶血單核細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人臍帶血單核細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人臍帶血單核細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人臍帶血單核細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEM無糖(含NEAA)500mL-

SF-295細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SF-295細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SF-295細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SF-295細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SF-295細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MKN-45細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MKN-45細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MKN-45細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MKN-45細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MKN-45細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

NCI-H1650細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H1650細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持NCI-H1650細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H1650細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H1650細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEMα(含雙抗)500mL-
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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