詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
中文名稱 | 沃氏葡萄球菌PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Staphylococcus warneriPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關產(chǎn)品:
單孢子蟲通用PCR檢測試劑盒Picobirnavirus(PBV)RNARTPCR
單孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒Pigeon Paramyxovirus(PPMV)RTPCR
單胞菌通用PCR檢測試劑盒Pigeon Pox Virus(PPV)PCR
單胞菌通用PCR檢測試劑盒 Plasmodium falciparum()PCR
單純皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Plasmodium malariaePCR
實驗過程:
一、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Dynactin 5(DC5)ELISA Kit信號傳導轉錄激活因子2ELISA試劑盒 STAT2免費代測試劑
Dynactin 4(DC4)ELISA Kit信號傳導轉錄激活因子5AELISA試劑盒 STAT5A免費代測試劑
Dynactin 3(DC3)ELISA Kit信號傳導轉錄激活因子5BELISA試劑盒 STAT5B免費代測試劑
Dynactin 2(DC2)ELISA Kit信號傳導子及轉錄激活子1ELISA試劑盒 STAT1免費代測試劑
Dynactin 1(DC1)ELISA Kit信號傳導子及轉錄激活子2ELISA試劑盒 STAT2免費代測試劑
Dynein, Cytoplasmic 1, Heavy Chain 1(DYNC1H1)ELISA Kit信號傳導子及轉錄激活子3ELISA試劑盒 STAT3免費代測試劑
Apoptosis Inhibitor 5(API5)ELISA Kit信號傳導子及轉錄激活子5ELISA試劑盒 STAT5免費代測試劑
Apoptosis Signal Regulating Kinase 1(ASK1)ELISA Kit信號傳導子及轉錄激活子6ELISA試劑盒 STAT6免費代測試劑
Amyloid Beta Precursor Like Protein 2(APLP2)ELISA Kit信號淋巴細胞激活分子家族成員7ELISA試劑盒 SLAMF7免費代測試劑
Amylase Gamma(Amyg)ELISA Kit信號識別顆??贵wELISA試劑盒 SRP免費代測試劑
Amylase Beta(Amyb)ELISA Kit信號素3BELISA試劑盒 SEMA3B免費代測試劑
Amylase Alpha(Amya)ELISA Kit信號素3DELISA試劑盒 SEMA3D免費代測試劑
沃氏葡萄球菌PCR檢測試劑盒胰α2(AMY2A)重組蛋白Recombina Amylase, Alpha 2A (AMY2A)
ⅡA組磷脂酶A2(PLA2G2A)重組蛋白Recombina Phospholipase A2, Group IIA (PLA2G2A)
核糖核suan酶P(RNASEP)重組蛋白Recombina Ribonuclease P (RNASEP)
血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶2(ADAMTS2)重組蛋白Recombina A Disiegrin And Metalloproteinase With Thr?