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兔角膜基質(zhì)細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 09:00:14瀏覽次數(shù):230

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 角膜組織
兔角膜基質(zhì)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:原代星狀細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代巨噬細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代間充質(zhì)干細(xì)胞無血清細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基25mL(20X)原代間充質(zhì)干細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代內(nèi)皮祖細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基5mL(100X)

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔角膜基質(zhì)細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

角膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,占據(jù)角膜厚度的90%,由角膜基質(zhì)細(xì)胞、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整,透明度高的特點,正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分,維持角膜的透明度,此細(xì)胞對于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義。角膜基質(zhì)細(xì)胞,存在于角膜基質(zhì)層中,在正常情況下,處于靜止?fàn)顟B(tài)。但當(dāng)角膜損傷時,不同上皮來源的因子及環(huán)境信號,將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng),決定著角膜能否被修復(fù)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合膠原消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NK2抗體 CD3封閉多肽 

單鏈結(jié)合蛋白70抗體 牛血清白蛋白偶聯(lián)物 

鈉鈣交換蛋白2抗體 信號調(diào)節(jié)蛋白α封閉多肽 

ZNFN1A2蛋白抗體 細(xì)胞角蛋白7封閉多肽 

胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體 磷化微管相關(guān)蛋白封閉多肽 

皮卡丘抗體 ZNT6蛋白封閉多肽 

細(xì)胞色C氧化7A2樣蛋白抗體 線粒體核糖體蛋白L54封閉多肽 

賴氨特異性脫甲基4B抗體 SPOCD1蛋白封閉多肽 

腫瘤壞死因子配體超家族成員10C 睪丸分化過程轉(zhuǎn)錄因子MRO封閉多肽 

3'-5'外切1蛋白抗體 磷半乳糖尿苷轉(zhuǎn)移1封閉多肽 

5-羥色胺受體1B抗體 鈉鈣交換蛋白3封閉多肽 

脆性X相關(guān)蛋白1/脆性X智力低下綜合征相關(guān)蛋白1抗體 FBXL21蛋白封閉多肽 

5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白抗體 囊泡轉(zhuǎn)運蛋白SEC20 封閉多肽 

酪蛋白激1γ2/casein kinase Iγ1抗體 磷化核因子κB抑制蛋白α封閉多肽 

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白6抗體 重組人甘露聚糖結(jié)合凝集絲氨肽2蛋白 

核小體組裝蛋白1抗體 TOM1L2蛋白封閉多肽 

DNA切除修復(fù)蛋白1單克隆抗體 ELOV3蛋白封閉多肽 

細(xì)胞核因子p105/k基因結(jié)合核因子抗體 PTCD3蛋白封閉多肽 
兔角膜基質(zhì)細(xì)胞大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEM無糖(不含酚紅、L-)500mL-

H22細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4H22細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持H22細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含H22細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于H22細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

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DMEM/F12培養(yǎng)基(含HEPES、10%FBS)125mL×4DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營養(yǎng)成分,含有多種微量元,廣泛應(yīng)用于多種哺乳類細(xì)胞的培養(yǎng)。同時,DMEM/F12培養(yǎng)基常作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ),也適用于低血清含量下哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。

Waymouth's MB 752/1500mL-

SW620細(xì)胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4SW620細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SW620細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW620細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW620細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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