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大鼠腸成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:21:55瀏覽次數(shù):222

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腸組織
大鼠腸成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:原代角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代巨噬細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代巨噬細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠腸成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至gang門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過直腸經(jīng)gang門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。各種哺乳動(dòng)物腸的結(jié)構(gòu)和功能基本相似。腸壁結(jié)構(gòu)一般分4層,由外向內(nèi)依次為:漿膜層(腹腔臟層),平滑肌層,黏膜下層和黏膜層。平滑肌層的外層為縱行肌纖維,內(nèi)層為環(huán)形肌纖維,兩者都以螺旋式走行,它們以收縮和舒張來完成腸的機(jī)械性消化。黏膜層又分為3層:靠近黏膜下層的是一層平滑肌,稱為黏膜肌層。其次為結(jié)締組織,又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)成的黏膜。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-胰聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鈣磷蛋白2抗體 磷化神經(jīng)細(xì)胞特異性微管蛋白封閉多肽 

FGD4蛋白抗體 細(xì)胞色氧化缺失蛋白2封閉多肽 

粘蛋白3抗體 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族39成員7封閉多肽 

FBXL3蛋白抗體 20號(hào)染色體開放閱讀框144封閉多肽 

脫氧鳥苷激抗體 纖維蛋白肽A封閉多肽 

皮層蛋白結(jié)合蛋白2N端樣蛋白抗體 鋅指蛋白167封閉多肽 

高爾基體磷蛋白6抗體 B淋巴細(xì)胞白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子2封閉多肽 

磷化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 中間絲相關(guān)蛋白封閉多肽 

C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體 巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白8封閉多肽 

腎囊腫蛋白1抗體 腫瘤壞死因子配體超家族成員18封閉多肽 

隱花色蛋白1抗體 清道夫受體B2封閉多肽 

線粒體核糖體蛋白S10抗體 磷化Disabled 1封閉多肽 

雙特異性蛋白磷6/絲裂原活化蛋白激磷3抗體 促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體2封閉多肽 

核苷腺苷轉(zhuǎn)移2抗體 CD44封閉多肽 

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)家族蛋白13抗體 SPG48蛋白封閉多肽 

膜類胰1抗體 酪氨蛋白激3封閉多肽 

凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體 結(jié)合珠蛋白家族3A1封閉多肽 

同源盒蛋白SIX1抗體 長鏈烯脂酰水化封閉多肽 
大鼠腸成纖維細(xì)胞人卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人卵巢顆粒細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人卵巢顆粒細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人卵巢顆粒細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

HEC-1-A細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HEC-1-A細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持HEC-1-A細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HEC-1-A細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HEC-1-A細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

兔膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔膀胱平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔膀胱平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔膀胱平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MFC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MFC細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持MFC細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MFC細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MFC細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

兔肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔肺成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔肺成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔肺成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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