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人破骨細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 09:24:27瀏覽次數(shù):252

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨髓
人破骨細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:原代黑色細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代黑色細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代成骨細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人破骨細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自分離自骨骼外的造血系統(tǒng),其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機(jī)制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時間較短。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用機(jī)械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)TRAP染色檢測,純度可達(dá)30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  多核巨細(xì)胞

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化接頭蛋白Gab 1抗體 剪切和多聚腺苷化特異性因子73蛋白封閉多肽 

X連鎖生長調(diào)控因子GCFX抗體 白細(xì)胞介10封閉多肽 

SCAPER蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體γ7封閉多肽 

Rho相關(guān)蛋白激2單克隆抗體 HSPC111蛋白封閉多肽 

磷化動力蛋白1抗體 缺氧誘導(dǎo)基因95封閉多肽 

17β羥類固醇脫氫14/17β-HSD14抗體 雞新城疫融合糖蛋白F2封閉多肽 

SMUG1蛋白抗體 鉀離子通道Kir2.1封閉多肽 

CD5L抗體 鋅指蛋白408封閉多肽 

乳腺癌相關(guān)蛋白SGA 1M抗體 吲哚胺N-甲基轉(zhuǎn)移封閉多肽 

CD2結(jié)合蛋白3抗體 重組2 Spike突變蛋白RBD (K417T、E484K、N501Y) 

顆粒細(xì)胞分化蛋白抗體 鋅指蛋白10封閉多肽 

AKT相互作用蛋白抗體 人類免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp36封閉多肽 

碳酐2抗體 轉(zhuǎn)錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4封閉多肽 

鋅指蛋白200抗體 DNA甲基轉(zhuǎn)移-3β封閉多肽 

核蛋白9 / Ran結(jié)合蛋白M單克隆抗體 ras基因相關(guān)蛋白Rab33b封閉多肽 

泛蛋白連接J2抗體 中心體蛋白95封閉多肽 

類固醇受體激活蛋白2抗體 CCDC132封閉多肽 

嗅覺受體51F1抗體 維甲相關(guān)孤兒受體β封閉多肽 
人破骨細(xì)胞大鼠外周血單個核細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠外周血單個核細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠外周血單個核細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠外周血單個核細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠外周血單個核細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MCF 10A細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MCF 10A細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MCF 10A細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MCF 10A細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MCF 10A細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠卵泡膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠卵泡膜細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠卵泡膜細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠卵泡膜細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠卵泡膜細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MDA-MB-436細(xì)胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4MDA-MB-436細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MDA-MB-436細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MDA-MB-436細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MDA-MB-436細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Leibovitz's L-15(不含酚紅)500mL-

兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基100mL兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基專門為兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化而開發(fā),針對兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的特性優(yōu)化分化試劑的配方,可增加兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化效果。本產(chǎn)品不含血清成分,但含其他血清替代物蛋白成分,僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。培養(yǎng)基組成成分成分名稱添加體積(規(guī)格200ML)添加體積(規(guī)格100ML)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化基礎(chǔ)培養(yǎng)基194mL97mL鈉 SodiumPyruvate200μL100μLITS添加物 ITS+supplement1mL*21mLTGF-β31mL*21mL抗壞血 AscorbicAcid600μL300μL脯氨 Proline200μL100μL Dexamethasone20μL10μL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL1mL染色劑阿利辛藍(lán)染液                                                      10ML/5ML      注:各成分請根據(jù)試劑管上標(biāo)簽標(biāo)示溫度保存。

小鼠破骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠破骨細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠破骨細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠破骨細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠破骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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