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人外周血巨噬細胞

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更新時間:2023-04-21 15:20:23瀏覽次數(shù):255

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 外周血
人外周血巨噬細胞的相關(guān)產(chǎn)品:人肝門靜脈成纖維細胞原代細胞5×105人結(jié)腸癌相關(guān)成纖維細胞原代細胞5×105人腎小管上皮細胞原代細胞5×105人腎小球系膜細胞原代細胞5×105人腎小球內(nèi)皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人外周血巨噬細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

外周血

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細胞,而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應(yīng)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用取外周血、通過密度梯度離心法、差速貼壁、細胞因子誘導(dǎo)法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  巨噬細胞樣

傳代特性   屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液  12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白4抗體 Toll樣受體2(CD282)封閉多肽 大鼠乙酰酯(AChE) ELISA試劑盒

MOSC2蛋白抗體 周期依賴激1封閉多肽 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT) 試劑盒 ELISA

1號染色體開放閱讀框228抗體 激活受體-2封閉多肽 大鼠總膽汁(TBA) ELISA檢測試劑盒

8號染色體開放閱讀框30a抗體 MOBKL2A蛋白封閉多肽 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA Kit

核突觸蛋白-α(N端)抗體 磷化肌肉型6磷果糖激/磷果糖激1封閉多肽 大鼠結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒

三羧載體樣蛋白3抗體 2 Spike S1(P681H)突變多肽 大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)試劑盒 ELISA

肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體 效應(yīng)細胞受體1封閉多肽 大鼠血管性血友病因子裂解(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA檢測試劑盒

神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK5抗體 磷化酪氨蛋白激受體B1封閉多肽 大鼠主要堿性蛋白(MBP) ELISA Kit

整合α11單克隆抗體 重組2 Spike突變蛋白RBD(L452R,E484Q)  大鼠嗜性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒

生發(fā)中心激樣激抗體 乙型肝炎病毒X蛋白上調(diào)基因11封閉多肽 大鼠鈣調(diào)磷(CaN) 試劑盒 ELISA

免疫球蛋白μ鏈結(jié)合蛋白2抗體 鞘磷脂磷二酯4封閉多肽 大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA檢測試劑盒

自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 ENPP4蛋白封閉多肽 大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)ELISA Kit

嗅覺受體52E2抗體 金屬組織抑制因子-1封閉多肽 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒

12輕鏈抗體 磷化腎上腺能受體β2/β2-AR封閉多肽 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA) 試劑盒 ELISA

同源盒蛋白C4抗體 絲氨抑制劑B10封閉多肽 大鼠堿性磷(ALP)ELISA檢測試劑盒

ZCCHC2蛋白抗體 重組人CD80蛋白 大鼠血管生成4(ANG-4)ELISA Kit

細胞周期蛋白依賴性激抑制蛋白3抗體 肌肉封閉多肽 大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP) ELISA試劑盒

9號染色體開放閱讀框93抗體 磷化p21激活激1/2封閉多肽 大鼠乙醇脫氫(ADH)試劑盒 ELISA
人外周血巨噬細胞兔胰島細胞英文名稱:兔胰島細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔垂體細胞英文名稱:兔垂體細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔胸腺上皮細胞英文名稱:兔胸腺上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔胸腺基質(zhì)細胞英文名稱:兔胸腺基質(zhì)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔頜下腺上皮細胞英文名稱:兔頜下腺上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔腎上腺皮質(zhì)細胞英文名稱:兔腎上腺皮質(zhì)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔腎上腺髓質(zhì)細胞英文名稱:兔腎上腺髓質(zhì)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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