詳細(xì)介紹
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 痘苗病毒PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Vaccinia Virus(VV)PCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品:
黃瓜綠斑駁花葉病毒RT-PCR試劑盒
黃瓜綠斑駁花葉病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
黃綠青霉PCR檢測試劑盒
黃綠青霉探針法熒光定量PCR試劑盒
黃曲霉PCR檢測試劑盒
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
原鈣黏素1ELISA試劑盒 PCDH1Human Tetanus Aibody Elisa Kit
原鈣黏素18ELISA試劑盒 PCDH18Human Leptospira IgG, Lep IgG Elisa Kit
原鈣黏素17ELISA試劑盒 PCDH17Human Amebiasis Elisa Kit
原鈣黏素12ELISA試劑盒 PCDH12Human Diphtheria aibody Elisa Kit
原鈣黏素11ELISA試劑盒 PCDH11Human Cysticercosis aybody, CYT Ab Elisa Kit
原鈣黏素10ELISA試劑盒 PCDH10Human Brucella Aibody IgG, Brucella Ab IgG Elisa Kit
原卟啉ELISA試劑盒 EPPHuman Varicella zoster virus IgM, VZV IgM Elisa Kit
3ELISA試劑盒 PRM3Human Varicella zoster virus IgG, VZV-IgG Elisa Kit
2ELISA試劑盒 PRM2Human Legionella aibody IgA, LP Ab-IgA Elisa Kit
1ELISA試劑盒 PRM1Human Legionella aibody IgM, LP Ab-IgM Elisa Kit
釉原蛋白Y-連鎖ELISA試劑盒 AMELYHuman Legionella aibody IgG, LP Ab-IgG Elisa Kit
釉原蛋白X-連鎖ELISA試劑盒 AMELXHuman paramyxovirus parotitis IgM Elisa Kit
釉成熟蛋白ELISA試劑盒 AMHuman paramyxovirus parotitis IgG Elisa Kit
有絲分裂原活化蛋白激酶14ELISA試劑盒 MAPK14Human epstein-barr virus IgM, EBv IgM Elisa Kit
痘苗病毒PCR檢測試劑盒谷氨suan脫氫酶(GLUD1)重組蛋白Recombina Glutamate Dehydrogenase 1 (GLUD1)
轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(PALB)重組蛋白Recombina Prealbumin (PALB)
二氫硫辛suan脫氫酶(DLD)重組蛋白Recombina Dihydrolipoyl Dehydrogenase (DLD)
色氨酰tRNA合成酶(WARS)重組蛋白Recombina Tryptophanyl tRNA Syhetase (WARS)
Corin蛋白(CRN)重組蛋白Re?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。