詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
大鼠視網膜色素上皮細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 視網膜組織 |
商品詳細介紹:
4.細胞簡介:
分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節(jié)細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強。視網膜色素上皮(RPE)位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質和代謝終產物轉運通道;主要是由單層色素上皮細胞所構成,排列十分規(guī)則。視網膜色素上皮參與循環(huán),吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形,細胞分為三部分,即頂部、體部和基底部。視網膜色素上皮細胞無再生能力,細胞死亡后不被替換,而是鄰近的細胞向側面滑動,以填補死亡細胞遺留下來的空間。視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與循環(huán),吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
實驗室分離的經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; |
HLA-DR抗體 內臟異位相關蛋白/鋅指蛋白203封閉多肽
磷化細胞核因子/k基因結合核因子p100抗體 GTPIMAP家族成員1封閉多肽
酪氨蛋白激B3抗體 叉頭蛋白F2封閉多肽
γ-谷氨酰轉肽2重鏈抗體 磷化促凋亡Bik蛋白封閉多肽
鋅指蛋白321B抗體 精子成熟相關蛋白BOULE封閉多肽
組織相容性復合體蛋白2反式激活因子抗體 胞漿蘋果1封閉多肽
整合β6/Integrin β6抗體 染色體相關蛋白2封閉多肽
線粒體鐵轉運蛋白2抗體 絲氨/蘇氨蛋白激Nek11封閉多肽
成纖維細胞生長因子17抗體 FITM2蛋白封閉多肽
DZANK1蛋白抗體 Kelch樣蛋白17封閉多肽
G蛋白偶聯受體激6抗體 波形蛋白封閉多肽
BEND4蛋白抗體 4號染色體開放閱讀框3封閉多肽
鋅指脂蛋白-1b抗體 COPS9蛋白封閉多肽
羥磺基轉移2抗體 異質核糖核蛋白H封閉多肽
血小板反應蛋白2/敏感蛋白2抗體 KIAA0701蛋白封閉多肽
磷化蛋白酪氨激JAK-3抗體 磷化γ氨基丁γ2受體封閉多肽
自主生長因子GFI1抗體 視網膜色上皮細胞特異性蛋白65封閉多肽
嗅覺受體5L2抗體 神經突觸13封閉多肽
大鼠視網膜色素上皮細胞人卵巢成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
人臍帶血造血干細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
人子宮平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠前列腺上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠牙齦成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠真皮微血管內皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
HTR-8/Svneo (人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞) RPMI-1640+5% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶