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大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:32:11瀏覽次數(shù):225

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 肝動脈組織
大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠外根鞘細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠毛囊角質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠脂肪干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈供應(yīng)左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時(shí)存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時(shí)存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時(shí),此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞是襯于肝動脈內(nèi)表面的單層扁平上皮,在炎癥時(shí)高表達(dá)黏附分子,與血流中白細(xì)胞表面黏附分子相互作用,從而介導(dǎo)白細(xì)胞穿越血管壁,亦屬一類非專職抗原提呈細(xì)胞。它們吞噬異物、細(xì)菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動,包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì),如白血球進(jìn)出血管。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肝動脈組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

程序性細(xì)胞死亡2樣抗體 GalNAc-T5蛋白封閉多肽 

三號染色體開放閱讀框抗體 核仁自身抗原SC65封閉多肽 

膠質(zhì)母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體 磷化蛋白激C theta封閉多肽 

鋅指蛋白32抗體 G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子8封閉多肽 

轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白/前白蛋白單克隆抗體 胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白1封閉多肽 

MPP2蛋白抗體 磷化原癌基因c-Met封閉多肽  

腦鈣粘蛋白12抗體 細(xì)胞角蛋白18封閉多肽 

豬藍(lán)耳病病毒M蛋白抗體 體激活因子PA28γ封閉多肽 

細(xì)胞角蛋白6抗體 CD2F-10封閉多肽 

神經(jīng)營養(yǎng)因子受體相互作用因子1抗體 1號染色體開放閱讀框19封閉多肽 

Rho GTP激活蛋白32抗體 TBC結(jié)構(gòu)域TB10A蛋白封閉多肽 

磷化血小板源性生長因子受體-α抗體 β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端多肽 

活化半胱胺蛋白-3抗體 鈉離子通道相關(guān)蛋白1封閉多肽 

溶質(zhì)載體家族13成員2抗體 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3封閉多肽 

APC標(biāo)記小鼠抗人CD8單克隆抗體 二甲基化組蛋白H3K4封閉多肽 

磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 鉀氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白KCC4封閉多肽 

α-s1酪蛋白抗體 鋅指蛋白FYCO1封閉多肽 

分泌凋亡相關(guān)蛋白5抗體 SEC23相互作用蛋白封閉多肽 
大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞SUP-B15細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SUP-B15細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SUP-B15細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SUP-B15細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SUP-B15細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

BC3H1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4BC3H1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持BC3H1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含BC3H1細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于BC3H1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Panc02細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4Panc02細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持Panc02細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Panc02細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Panc02細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)培養(yǎng)基100mL小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)的體外培養(yǎng)。

L2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4L2細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持L2細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含L2細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于L2細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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