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商品詳細(xì)介紹:
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
分離自冠狀動(dòng)脈組織;冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,起于主動(dòng)脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型:右優(yōu)勢(shì)型、均衡型、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的第一對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干,發(fā)自左主動(dòng)脈竇,經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動(dòng)脈壁的主要細(xì)胞成分,細(xì)胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等。因此,原代分離培養(yǎng)的冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,對(duì)研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機(jī)制具有非常重要的作用。冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
5.方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 冠狀動(dòng)脈 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; |
英文名稱: GAB1 重組小鼠糖蛋白gp330蛋白
MICAL3蛋白抗體 RAB36蛋白封閉多肽
英文名稱: TAK1/MAP3K7 蛋白激B3封閉多肽
ADCYAP1單克隆抗體 對(duì)接蛋白3封閉多肽
G蛋白偶聯(lián)受體GPR180蛋白抗體 白三烯B4受體1封閉多肽
DNA聚合Κ抗體 殺傷細(xì)胞凝集樣受體F1封閉多肽
CYP1A2單克隆抗體 Ran結(jié)合蛋白MOG1封閉多肽
血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(CD106)抗體 重組人胰島蛋白
骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體 高遷移率族結(jié)合蛋白N4封閉多肽
眼部白化病相關(guān)蛋白OA1/蛋白偶聯(lián)受體143抗體 重組豬藍(lán)耳病病毒N蛋白
DNAJC22蛋白抗體 E3泛蛋白連接HECW2封閉多肽
PSF2蛋白抗體 絲氨/蘇氨蛋白激蛋白封閉多肽
英文名稱: PDHA1 L12R1蛋白封閉多肽
γ1氨基丁受體α5/GABRα5抗體 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3封閉多肽
PRTG蛋白抗體 Myc Tag多肽
英文名稱: MMP9 細(xì)胞色C氧化蛋白6B2封閉多肽
英文名稱: Oxytetracycline 促黑細(xì)胞激α封閉多肽
整合αX單克隆抗體 膜相關(guān)環(huán)指蛋白6封閉多肽
小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞無外泌體血清英文名稱:無外泌體血清50mL
雞血清英文名稱:雞血清100mL
氟英文名稱:5-FU10mg
氟英文名稱:5-FU1g
英文名稱:Taxol10mg
吉西他濱英文名稱:GEM10mg
鹽阿霉英文名稱:ADR25mg
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。