詳細(xì)介紹
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 禽傳染性支氣管炎病毒PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品:
Streptomyces spp.PCR牛乳頭瘤病毒PCR檢測試劑盒
Streptococcus zooepidemicusPCR牛丘疹性口炎病毒PCR檢測試劑盒
Streptococcus uberisPCR牛副流感病毒型PCR檢測試劑盒
Streptococcus thermophilusPCR牛細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒
Streptococcus suiPCR牛呼腸孤病毒PCR檢測試劑盒
Streptococcus spp.PCR牛呼吸道合胞體病毒PCR檢測試劑盒
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
人前列腺素E2(PGE2)ELISA檢測試劑盒Human BAFF ELISA Kit
人前列腺素E1(PGE1)ELISA檢測試劑盒 Human Ai-Group B Streptococcal Type III Capsular Aibody IgG ELISA Kit
人前列腺素D合成酶(PTGDS)試劑盒ELISAHuman CD20 ELISA Kit
人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA KitHuman blca-4 ELISA Kit
人前列腺素D合成酶(PGDS)試劑盒ELISAHuman blca-1 ELISA Kit
人前列腺素D合成酶(PGDS)試劑盒 ELISAHuman BCL2L1 ELISA Kit
人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA檢測試劑盒 Human B7-H4 ELISA Kit
人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA檢測試劑盒Human group A streptococcal polysaccharide aigen,ASP Ag ELISA kit
人前列腺素D2(PGD2)ELISA試劑盒human Akap12 ELISA Kit
人前列腺素A1(PGA1)試劑盒ELISAHuman ARID1A ELISA Kit
人前列環(huán)素(PGI2)ELISA檢測試劑盒Human Apelin ELISA kit
人前列環(huán)素(PGI)ELISA檢測試劑盒Human apelin 36,AP36 ELISA Kit
人前列環(huán)素(PGI) ELISA檢測試劑盒 Human apelin 13,AP13 ELISA Kit
人前顆粒蛋白(PGRN)ELISA試劑盒Human apelin 12,AP12 ELISA Kit
禽傳染性支氣管炎病毒PCR檢測試劑盒Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)NADH脫氫酶1(ND1)重組蛋白
Thyroid Peroxidase (TPO)NADH脫氫酶1(ND1)重組蛋白
Thyroid Peroxidase (TPO)NADH脫氫酶5(ND5)重組蛋白
Thyroid Peroxidase (TPO)NADH脫氫酶5(ND5)重組蛋白
Phospholipase A2 Activating Protein (PLAP)NADP依賴性蘋果?
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。