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大鼠腹腔巨噬細胞

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更新時間:2023-04-23 09:27:05瀏覽次數(shù):238

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腹膜組織
大鼠腹腔巨噬細胞的相關產(chǎn)品:原代內(nèi)膜細胞培養(yǎng)體系細胞培養(yǎng)基500mL原代B淋巴細胞培養(yǎng)體系細胞培養(yǎng)基100mL原代B淋巴細胞培養(yǎng)體系細胞培養(yǎng)基500mL原代腎足細胞培養(yǎng)體系細胞培養(yǎng)基100mL原代腎足細胞培養(yǎng)體系細胞培養(yǎng)基500mL

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠腹腔巨噬細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

腹膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腹腔;腹腔,即軀干腹部的腔,內(nèi)襯腹膜,由體壁、橫膈膜和盆底圍成,其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內(nèi)臟器官。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細胞,而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應。巨噬細胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一;腹腔巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用反復往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結合差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  巨噬細胞樣

傳代特性  屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液  (12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

整合連接激相關絲氨/蘇氨磷抗體 內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪/前B細胞克隆增強因子1封閉多肽 

環(huán)指蛋白75單克隆抗體 軸絲動力蛋白6封閉多肽 

缺氧誘導因子1α抑制蛋白/HIF1AN抗體 GDF5OS蛋白封閉多肽 

抑癌基因Rbms3抗體 鋅指蛋白759封閉多肽 

鉀離子通道多聚體結構域蛋白12抗體 神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白1封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體 人類皰疹病毒8 G蛋白偶聯(lián)受體封閉多肽 

真核翻譯起始因子4B單克隆抗體 絲氨抑制劑B11封閉多肽 

中心體蛋白78抗體 突觸泡蛋白2B封閉多肽 

白細胞介17受體E抗體 磷化熱休克因子1封閉多肽 

S-腺苷蛋氨脫羧抗體 NMRAL1蛋白封閉多肽 

T細胞特異性趨化因子抗體 Apollon凋亡抑制蛋白封閉多肽 

甘氨受體α3/GlyR α3抗體 嗅覺受體52B2封閉多肽 

基質(zhì)細胞衍生因子1抗體 DRAM2蛋白封閉多肽 

植物凝集IB4 酪氨磷α封閉多肽 

英文名稱: phospho-MLKL (Ser345) 磷化周期C封閉多肽 

alpha 1腎上腺能受體B抗體 鈉離子/?;悄懝厕D(zhuǎn)運蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白184抗體 PE-Cy5.5標記鏈霉親和 

染色質(zhì)解旋DNA結合蛋白抗體 雄激受體相關蛋白24封閉多肽 
大鼠腹腔巨噬細胞RPMI-1640無糖500mL-

人腦動脈血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL人腦動脈血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人腦動脈血管內(nèi)皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人腦動脈血管內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人腦動脈血管內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)。

DMS 153細胞專用培養(yǎng)基125mL×4DMS 153細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持DMS 153細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含DMS 153細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于DMS 153細胞的體外培養(yǎng)。

人髂動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL人髂動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人髂動脈內(nèi)皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人髂動脈內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人髂動脈內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)。

EJ-1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4EJ-1細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持EJ-1細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含EJ-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于EJ-1細胞的體外培養(yǎng)。

GC-2spd(ts)細胞專用培養(yǎng)基125mL×4GC-2spd(ts)細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持GC-2spd(ts)細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含GC-2spd(ts)細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于GC-2spd(ts)細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠脊髓神經(jīng)元細胞培養(yǎng)基100mL大鼠脊髓神經(jīng)元細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠脊髓神經(jīng)元細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠脊髓神經(jīng)元細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠脊髓神經(jīng)元細胞的體外培養(yǎng)。


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