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小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:29:33瀏覽次數(shù):251

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨髓
小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠卵巢間質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠輸卵管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠輸卵管平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠子宮平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,亦稱為成血管細(xì)胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代;不建議多次傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

膀胱癌相關(guān)蛋白BLCAP抗體 γ-谷氨酰水解封閉多肽 

LYSMD4蛋白抗體 多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移13封閉多肽 

腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 富含半胱氨與表皮生長因子樣蛋白1封閉多肽 

巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體 嗜乳桿菌假定蛋白 

鋅指蛋白791抗體 細(xì)胞角蛋白19片段(CYFR21-1)封閉多肽 

組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移抗體 細(xì)胞表面趨化因子受體2A封閉多肽 

NSUN4蛋白抗體 鋅指蛋白793封閉多肽 

麻疹病毒融合蛋白F抗體 鉀通道相互作用蛋白3封閉多肽 

巨噬細(xì)胞炎性蛋白3樣蛋白1抗體 內(nèi)皮單核細(xì)胞激活肽2封閉多肽 

英文名稱: 2-Naphthoic acid 環(huán)指蛋白211封閉多肽 

二磷3核苷抗體 磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1封閉多肽 

淋巴細(xì)胞相關(guān)AF4樣蛋白抗體 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SEC63封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 激活PA200封閉多肽 

磷化B-Raf抗體 RTDR1蛋白封閉多肽 

單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 腎上腺能受體β2/β2-AR封閉多肽 

核糖體蛋白4Y2抗體 9號染色體開放閱讀框115封閉多肽 

神經(jīng)細(xì)胞膜糖蛋白M6b抗體 CD44V4封閉多肽 

鋅指蛋白RIZ1抗體 乳腺癌抵抗標(biāo)記蛋白1封閉多肽 
小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞MEM (含NEAA、L-丙氨酰-L-,不含酚紅)500mL-

SILAC RPMI-1640 Medium500mL-

雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖 (不含L-、鈉)500mL-

人心肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人心肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人心肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人心肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人心肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠小腸平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠小腸平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠小腸平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠前列腺上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠前列腺上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠前列腺上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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