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人骨髓來源內皮祖細胞

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更新時間:2023-04-23 10:35:08瀏覽次數(shù):263

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

人骨髓來源內皮祖細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞,亦稱為成血管細胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞,缺乏成熟內皮細胞的特征性表型,不能形成管腔樣結構,其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復。研究顯示,內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代;不建議多次傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

錨蛋白重復結構域蛋白37抗體 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽 

肌球蛋白重鏈6抗體 聚合延伸因子2封閉多肽 

鉀離子通道KCNJ18抗體 8/第八/第八因子相關抗原封閉多肽 

SIKE1蛋白抗體 CD105封閉多肽 

S100A8+A9 Complex單克隆抗體 TOX4蛋白封閉多肽 

SGT1蛋白抗體 FP100蛋白封閉多肽 

英文名稱: IKB epsilon 磷化非受體型酪氨蛋白激封閉多肽 

肝特異性有機陰離子轉運蛋白LST1抗體 BCL10結合蛋白和激活核轉錄因子封閉多肽 

背板膠質乙酰酯抗體 內吞作用輔助蛋白EPN2封閉多肽 

間變型淋巴瘤激抗體 環(huán)指蛋白94封閉多肽 

鐵調節(jié)蛋白25抗體 突觸后密度蛋白95封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激Nek3抗體 細胞間粘附分子-1封閉多肽 

甲狀腺過氧化物抗體 卷曲螺旋結構域蛋白94封閉多肽 

英文名稱: MMP9 磷化樁蛋白Paxillin封閉多肽 

英文名稱: phospho-Alpha synuclein (Ser129) 22號染色體開放閱讀框13封閉多肽 

抗藥蛋白抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 

表皮生長因子受體3抗體 配體依賴核受體共抑制因子樣蛋白封閉多肽 

磷脂爬行3抗體 黑色瘤相關抗原8封閉多肽 
人骨髓來源內皮祖細胞U-2 OS [U2OS]細胞專用培養(yǎng)基125mL×4U-2 OS [U2OS]細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持U-2 OS [U2OS]細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含U-2 OS [U2OS]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于U-2 OS [U2OS]細胞的體外培養(yǎng)。

HMY-1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4HMY-1細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持HMY-1細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含HMY-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HMY-1細胞的體外培養(yǎng)。

KTC-1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4KTC-1細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持KTC-1細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含KTC-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于KTC-1細胞的體外培養(yǎng)。

P3X63Ag8.653細胞專用培養(yǎng)基125mL×4P3X63Ag8.653細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持P3X63Ag8.653細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含P3X63Ag8.653細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于P3X63Ag8.653細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠食管上皮細胞培養(yǎng)基100mL大鼠食管上皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持大鼠食管上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠食管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠食管上皮細胞的體外培養(yǎng)。

人角膜內皮細胞培養(yǎng)基100mL人角膜內皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持人角膜內皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含人角膜內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人角膜內皮細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠腎皮質上皮細胞培養(yǎng)基100mL大鼠腎皮質上皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持大鼠腎皮質上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠腎皮質上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腎皮質上皮細胞的體外培養(yǎng)。


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