詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:傳染性胸膜肺炎PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
相關(guān)產(chǎn)品:
口蹄疫病毒A型(FMDV-A)核suan檢測(cè)試劑盒
口蹄疫病毒A型/O型(FMDV-A/-O)核suan檢測(cè)試劑盒
口蹄疫病毒A血清型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
口蹄疫病毒A亞型PCR檢測(cè)試劑盒
口蹄疫病毒O型(FMDV-O)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA KitMouse Activin A, ACV-A Elisa Kit
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒 ELISAMouse Bone morphogenetic protein 2, BMP-2 Elisa Kit
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒Mouse Bone morphogenetic protein 4, BMP-4 Elisa Kit
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA檢測(cè)試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6, IGFBP-6 Elisa Kit
小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1δ, MIP-1δ Elisa Kit
小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒Mouse pulmonary activation regulated chemokine, PARC Elisa Kit
小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒Mouse Lysozyme, LZM Elisa Kit
小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA檢測(cè)試劑盒 Mouse soluble cluster of differeiation 30, sCD30 Elisa Kit
小鼠促黃體激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒 Mouse soluble myosin heavy chain 2, sMHC-2 Elisa Kit
小鼠促黃體激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouse soluble myosin heavy chain 1, sMHC-1 Elisa Kit
小鼠雌三醇(E3)試劑盒ELISAMouse Mucin-5 subtype AC, MUC5AC Elisa Kit
小鼠雌三醇(E3)ELISA KitMouse Angiotensin converting enzyme, ACE Elisa Kit
小鼠雌激素(E)試劑盒ELISAMouse angiotension Ⅱ, ANG-Ⅱ Elisa Kit
小鼠雌激素(E)試劑盒 ELISAMouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin, KAF/AR Elisa Kit
傳染性胸膜肺炎PCR檢測(cè)試劑盒4-氨基丁suan轉(zhuǎn)氨酶(ABAT)重組蛋白R(shí)ecombina 4-Aminobutyrate Aminotransferase (ABAT)
支鏈轉(zhuǎn)氨酶1(BCAT1)重組蛋白R(shí)ecombina Branched Chain Aminotransferase 1, Cytosolic (BCAT1)
支鏈轉(zhuǎn)氨酶1(BCAT1)重組蛋白R(shí)ecombina Branched Chain Aminotransferase 1, Cytosolic (BCAT1)
支鏈轉(zhuǎn)氨酶2(BCAT2)重組蛋白R(shí)ecomb?
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。