詳細(xì)介紹
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),*進(jìn)口來(lái)源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
產(chǎn)品名稱:N2添加劑細(xì)胞
英文名稱:N2
貨號(hào):BJ-01X10061
規(guī)格:5ml
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合2(PTGS2/COX-2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒磷烯單鹽疊氮磷二苯酯 97% 化銣 AR,99.5%
豬肌鈣蛋白T(Tn-T)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 磷烯三環(huán)已鹽二苯次膦酰 98%碳銣 99.8% metals basis
豬熱休克蛋白40(HSP-40)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 6-溴乙代磷二苯酯 97%氟化銣 AR
豬性唾液脯氨豐富蛋白1(PRB1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 6-溴乙衣康 AR,99.8%化銣 99.9%
豬胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 四銨衣康 CP,99%硫銣 99.99% metals basis
豬前列腺素D合成(PGDS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒四溴銨2-萘乙 99%硫銣 99.9% metals basis
豬蛋白激活受體2(PAR2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒四銨1-萘 95%硫銣 99.0%
豬前列腺素E受體3(EP3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吩乙硫鹽2-萘 98%銣標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml
豬小表皮粘蛋白(SBEM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-氨頡草1-萘 97%二氧化硅 輕質(zhì)AR,99.5%
豬骨成型蛋白受體II(BMPR2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-氨頡草菲醌 95%二氧化硅 99.99% metals basis,粒徑:5μm
豬核孔蛋白62KDa(NUP62)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-羥丁菲醌 99%二氧化硅 GR
豬內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化1(ECE1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-羥丁2-吡啶 99%二氧化硅 99.99% metals basis,粒徑:10μm
豬磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒β-內(nèi)酯(R)-(+)-2-(4-羥苯氧) 98%二氧化硅 SP
豬白分化抗原CD42 (CD42)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吡硫鎓鈉(S)-(-)-2-酯 98%二氧化硅 99.99% metals basis,粒徑:2μm
豬粘蛋白4(MUC4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吡硫鎓鈉3,5-二叔丁 98%二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml
豬核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吡硫鎓鈉乳糖,無(wú)水 AR,98%二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,體:0.05%Na2CO3
N2添加劑細(xì)胞肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體白介素5(IL-5)檢測(cè)試劑盒IL-5
ATPH+轉(zhuǎn)運(yùn)溶體輔助蛋白2抗體白介素4(IL-4)檢測(cè)試劑盒IL-4
肝素結(jié)合蛋白/陽(yáng)離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體白介素4(IL-4)檢測(cè)試劑盒IL-4
核突觸蛋白抗體白介素35(IL-35)檢測(cè)試劑盒IL-35
β-肌動(dòng)蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)白介素33(IL-33)檢測(cè)試劑盒IL-33
β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體白介素31(IL-31)檢測(cè)試劑盒IL-31
β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體白介素3(IL-3)檢測(cè)試劑盒IL-3
β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體白介素2受體β(IL2rb/CD122)檢測(cè)試劑盒IL2rb/CD122
激活素受體2A抗體白介素2受體(IL-2R)檢測(cè)試劑盒IL-2R
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。