詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:PBS緩沖液細(xì)胞
英文名稱:PBS
貨號(hào):BJ-01X10065
規(guī)格:500ml
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬線粒體乙脫氫(ALDM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 異香蘭4-氨三氟苯 98%硅粉 99.99%
豬過氧化物體增殖物激活受體γ( PPAR-γ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒異香蘭2,4-二羥苯 98%硅粉 99.99% metals basis,1-3mm,powder
豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR1/Flt1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒焦磷四芐酯1-羥-苯并-三氮唑(無水) 99%硅粉 99.99% metals basis,200目
豬磷脂A2受體1(PLA2R1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒焦磷四芐酯6-氧-2-乙酰萘 98%硝釤(III) 六水合物 99.9% metals basis
豬Smad同源物1 (Smad1/MADH1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 3-吲哚三十二烷 96%硝釤 99.999% metals basis
豬TATA框結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子(TAF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-吲哚二十烷 AR化銀 99%
豬癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-吲哚三十六烷 AR,96%氧化鈧(Ⅲ) 99.99% (REO)
豬狀腺激免疫球蛋白(TSI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒十九酯正十六烷 AR,98%氧化鈧(Ⅲ) 99.999% (REO)
豬遲現(xiàn)抗原(VLA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 十九酯正十六烷 >99.0% (GC)溴化銀 99.9%
豬可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1(sTfR1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒嘧啶十八烷 AR,98%溴化銀 98%
豬前列腺素F受體(FP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒嘧啶5- 98%草鍶 5N,99.999%
豬音猬因子(SHH )聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒嘧啶3,5-二溴 98%化鏑(III) 99.9%,無水級(jí),充氬封裝
豬血小板膜糖蛋白VI(GP6)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 鄰羥芐3,5-二 98%二氧化硅 AR
豬腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL/TNFSF10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒鄰羥芐三化磷 CP(劇品)氧化銀 99.99% metals basis
豬半乳凝集素3(GAL3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒1-苯-1,2-二三化磷 AR,99.00%(劇品)二氧化硅 99.99%,1-3mm
豬肝生長(zhǎng)因子(HGF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 1-苯-1,2-二叔丁鈉 98%化銀 99.99%
PBS緩沖液細(xì)胞肌肉素抗體絡(luò)石藤(標(biāo)準(zhǔn)品) D-(+)-Xylose
代謝型谷氨受體-3抗體絡(luò)緦(標(biāo)準(zhǔn)品) 2',3'-Dideoxyuridine
促代謝型谷氨受體2+3抗體駱駝蓬;駱駝蓬靈;哈梅靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Hygromycin B
促代謝型谷氨受體1+5抗體駱駝篷子(標(biāo)準(zhǔn)品) iBu-DMT-dG
MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體落花生枝葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Bz-DMT-dC
肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體落新婦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Bz-DMT-dA
肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體麻楓樹酚B(標(biāo)準(zhǔn)品) rU Phosphoramidite
磷化原癌因c-Met相關(guān)酪氨激抗體(草)(標(biāo)準(zhǔn)品) Bz-rA Phosphoramidite
絲裂原活化蛋白激13抗體(中)(標(biāo)準(zhǔn)品) i-bu-rG Phosphoramidite