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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 組織來(lái)源 | 皮膚組織 |
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 組織來(lái)源 |
大鼠真皮成纖維細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 皮膚組織 |
商品詳細(xì)介紹：
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：
分離自真皮組織；皮膚組織來(lái)源包括頭部、臉部、手、腳、腿、背部、腹部、包皮等體表部位皮膚，可依據(jù)需求選用；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。
5.方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的采用先中性dan白消化、后胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： | 二、免疫熒光鑒定： |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； |
血小板生成/巨核細(xì)胞集落刺激因子抗體 鋅指蛋白221封閉多肽
溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族35成員E1抗體 細(xì)胞膜蛋白Derlin封閉多肽
驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員18B抗體 烷基甘油酮磷合封閉多肽
核仁蛋白14抗體 環(huán)指蛋白14封閉多肽
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框59抗體 SLFNL1封閉多肽
泛蛋白連接Q1抗體 磷化eIF4E結(jié)合蛋白封閉多肽
線粒體核糖體蛋白S14抗體 LYRM2蛋白封閉多肽
腫瘤抑制基因野生型P53單克隆抗體 唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集1封閉多肽
英文名稱(chēng): CTNND1 四分子交聯(lián)體16封閉多肽
蛋白酪氨磷受體PTPRB抗體 RRAD封閉多肽
多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移13抗體 鹵脫鹵樣水解域內(nèi)含蛋白1A封閉多肽
糖皮質(zhì)激受體DNA結(jié)合因子1抗體 單純皰疹病毒1型轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子ICP22封閉多肽
糜C抗體 線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨/谷氨載體蛋白封閉多肽
CD7抗體 LYPD1蛋白封閉多肽
半胱胺蛋白-13抗體 重組人微管相關(guān)蛋白亞型4蛋白
POGK蛋白抗體 著絲粒蛋白V封閉多肽
鋅指蛋白137抗體 活化半胱胺蛋白-9封閉多肽
磷化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體 DDX58封閉多肽
大鼠真皮成纖維細(xì)胞NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1] (大鼠肺泡巨噬細(xì)胞) (種屬鑒定正確)Ham's F-12K＋20% FBS＋1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
HaK (敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞)MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
SW626 (人卵巢癌細(xì)胞) (DMEM) (STR鑒定正確) DMEM＋10% FBS＋1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
Super Tube (狗腎細(xì)胞)(種屬鑒定正確)DMEM/F12＋0.05mM NEAA＋10% FBS＋1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
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