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商品詳細(xì)介紹:
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
分離自胚肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱(chēng)喉為肺之門(mén)戶,鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。
5.方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 組織來(lái)源 |
大鼠胚肺成纖維細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 胚胎;肺組織 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; |
磷化原癌基因蛋白18 整合樣金屬與13型封閉多肽
熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗體 肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)FKBP11封閉多肽
α1微球蛋白單克隆抗體 離子通道蛋白Kv3.3封閉多肽
磷化KLF5抗體 B細(xì)胞活化因子受體(CD268)封閉多肽
FBXW8蛋白抗體 胎盤(pán)生長(zhǎng)因子封閉多肽
細(xì)胞色P450 19抗體 CD350封閉多肽
HHIP蛋白抗體 重組乙肝病毒核心抗原
C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體 核孔復(fù)合蛋白Nup53封閉多肽
白細(xì)胞介27β抗體 短鏈L-3羥烷基脫氫封閉多肽
甲基化樣蛋白21D抗體 重組腫瘤抑制基因P53/野生型P53蛋白
乳腺癌易感基因2抗體 痙攣性截癱相關(guān)蛋白20封閉多肽
DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體 DTWD1蛋白封閉多肽
羥基類(lèi)固醇脫氫3α/3α-羥類(lèi)固醇脫氫Ⅰ抗體 染色質(zhì)修飾蛋白CHMP7封閉多肽
分泌型免疫球蛋白A抗體 8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框30a封閉多肽
英文名稱(chēng): Valine 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽
CARD9抗體 胰島β細(xì)胞生長(zhǎng)因子封閉多肽
Cy7標(biāo)記小鼠抗人CD45單克隆抗體 磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)封閉多肽
α1微球蛋白單克隆抗體 抑制βB/Inhibin β B封閉多肽
大鼠胚肺成纖維細(xì)胞原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱(chēng):原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL
原代基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱(chēng):原代基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL
原代基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱(chēng):原代基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL
原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱(chēng):原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL
原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱(chēng):原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL
原代肥大細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱(chēng):原代肥大細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL
原代肥大細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱(chēng):原代肥大細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。