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兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞

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更新時間:2023-04-23 10:40:11瀏覽次數(shù):256

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 股骨、脛骨
兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠視網(wǎng)膜色上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶PC-12(Low differentiation) (大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠腎動脈平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠乳腺成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶HCT-15 (人結(jié)直腸腺癌細胞) (STR鑒定正確)1×10?

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

股骨、脛骨

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自股骨、脛骨;骨內(nèi)膜是一層致密結(jié)締組織膜,覆蓋在骨的表面(關(guān)節(jié)面除外),新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色,含有豐富的血管、神經(jīng)和成骨細胞。此外,附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起。因而骨內(nèi)膜與骨質(zhì)結(jié)合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管、神經(jīng),通過骨質(zhì)的滋養(yǎng)孔分布于骨質(zhì)和骨髓。骨內(nèi)膜分內(nèi)、外兩層,外層主要是粗大的膠原纖維束,部分纖維穿入骨質(zhì),使骨內(nèi)膜固定于骨面;內(nèi)層疏松,含成骨細胞和破骨細胞(分別具有產(chǎn)生新骨質(zhì)和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松質(zhì)的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結(jié)締組織膜,叫做骨膜。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細胞和破骨細胞的能力,以形成新骨質(zhì)和破壞、改造已生成的骨質(zhì),所以對骨的發(fā)生、生長、修復等具有重要意義。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用沖洗骨髓、消化骨內(nèi)膜、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

核糖體蛋白S6激樣1抗體 磷化絲裂原活化蛋白激激5封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄因子RBPL抗體 Bcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框115抗體 死亡受體3封閉多肽 

英文名稱: ADH1A CD244自然殺傷細胞受體2B4封閉多肽 

G蛋白γ 1/Gγ 1 抗體 磷化細胞死亡調(diào)解子封閉多肽 

1/Glutaminase抗體 酪氨蛋白激A3受體封閉多肽 

γ-微管蛋白GCP4抗體 轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM2封閉多肽 

弗林抗體 腫瘤/睪丸抗原3封閉多肽 

磷化微管相關(guān)蛋白抗體 Ⅴ型膠原封閉多肽 

肌鈣集蛋白/收鈣抗體 富含亮氨重復家庭蛋白1封閉多肽 

促甲狀腺釋放激抗體 H2A組蛋白家族成員J封閉多肽 

1號染色體開放閱讀框98抗體 熱休克蛋白-20封閉多肽 

磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體 泛載體蛋白L6封閉多肽 

細胞間粘附蛋白Vinexin抗體 磷化間變型淋巴瘤激封閉多肽 

脂肪細胞型脂肪結(jié)合蛋白 重組小鼠頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運體蛋白 

ADP核糖基化因子樣11抗體 DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白 

THAP11單克隆抗體 5-羥色胺受體2A封閉多肽 

芳香化抗體 血藍蛋白偶聯(lián)物 
兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞HA (人羊膜細胞)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠脾淋巴細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

BHT101 (人甲狀腺癌細胞(未分化)) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

兔羊膜間質(zhì)細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

M-7 (人胚胎成纖維細胞)MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

L1210 (小鼠白血病細胞) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

兔視網(wǎng)膜色上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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