詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:綿羊星狀病毒型PCR檢測試劑盒
英文名稱:Ovine Astrovirus 1(OAstV)1RTPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
Sema 3A ELISA Kit人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)試劑盒ELISA
pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase,PDXP ELISA Kit人血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)ELISA試劑盒
caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA Kit人血清淀粉樣蛋白P(SAP) ELISA檢測試劑盒
nasopharyngeal carcinoma,NPC ELISA Kit人血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒elisa
rhinovirus(RV)aibody(IgA)ELISA kit人血清素/血清胺(ST) ELISA Kit
Nandrolone Phenylpropionate,NP ELISA Kit人血清素/血清胺(ST)檢測試劑盒elisa
Bence-Jones protein,BJP ELISA Kit人血清總補體(CH50)檢測試劑盒elisa
cytoplasmic dynein,CD ELISA kit人血清總補體(CH50)試劑盒 ELISA
cytosolic phospholipase A2-α,cPLA2-α ELISA Kit人血栓前體蛋白(TpP)elisa試劑盒
cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit人血栓前體蛋白(TpP)試劑盒 ELISA
chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit 人血栓素A2(TX-A2) ELISA檢測試劑盒
Galactose ELISA Kit人血栓素A2(TX-A2)ELISA試劑盒
綿羊星狀病毒型PCR檢測試劑盒胱天8(CASP8)重組蛋白Recombina Caspase 8 (CASP8)
甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲氨suan2(MASP2)重組蛋白Recombina Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)
脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)重組蛋白Recombina Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2)
脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)重組蛋白Recombina Phospholipase A2 Group VII (L?