詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:蠟樣芽孢桿菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
人氧化型(GSSG)ELISA檢測試劑盒Human Myelin P2 protein,PMP2 ELISA kit
人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa試劑盒Human acidic isoferitin,AIF ELISA kit
人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb) 試劑盒 ELISAHuman Acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32 family member E(ANP32E)ELISA kit
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒ELISAHuman acidic fibroblast growth factor,aFGF/FGF-1 ELISA Kit
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL) 試劑盒 ELISAHuman tetrahydrobiopterin,BH4 ELISA Kit
人氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)試劑盒ELISAHuman Tetranectin,CLEC3B ELISA kit
人延伸蛋白A(EloA)ELISA檢測試劑盒 Human Death-associated protein 1,DAP/DAP1 ELISA kit
人延伸蛋白A(EloA)ELISA檢測試劑盒Human filariasis(philariasis)aibody IgG4 ELISA kit
人腺嘌呤二核苷suan磷suan(NADPH)ELISA檢測試劑盒Human Pancreatic secretory trypsin inhibitor,SPINK1 ELISA kit
人腺嘌呤二核苷suan磷suan(NADPH) ELISA試劑盒 Human mannan-binding lectin serine peptidase 2,MASP2 ELISA kit
人腺嘌呤二核苷suan(NAD)試劑盒ELISAHuman Serine protease HTRA1,HTRA1 ELISA kit
人牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)檢測試劑盒elisaHuman Serine/threonine-protein kinase 24,STK24 ELISA Kit
人牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)ELISA試劑盒Human Serine/threonine-protein kinase PAK 4,PAK4 ELISA kit
人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA檢測試劑盒 Human Serine/threonine-protein kinase B-raf,BRAF ELISA kit
蠟樣芽孢桿菌PCR檢測試劑盒類固醇5α還原酶2(SRD5a2)重組蛋白Recombina Steroid 5 Alpha Reductase 2 (SRD5a2)
醛固酮合酶(ALDOS)重組蛋白Recombina Aldosterone Syhase (ALDOS)
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白Recombina Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白Recombina Superoxide Dismutase 3, Extrace?