化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括絕對定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 奧爾森派琴蟲PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Perkinsus olseniPCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品：
五種致瀉性大腸桿菌PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）
人TBP基因PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）
MTHFR和MTRR基因檢測試劑盒(PCR熔解曲線法)
綠膿桿菌PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）
柯薩奇病毒B2型PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 |
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Lipase I(LIPI)ELISA Kit人腫瘤壞死因子受體超家族成員18(FRSF18)試劑盒ELISA
Lipase H(LIPH)ELISA Kit人腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1(TRAF1)ELISA試劑盒
Flotillin 2(FLOT2)ELISA Kit人腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)ELISA檢測試劑盒
Flotillin 1(FLOT1)ELISA Kit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA檢測試劑盒
Positive Cofactor 4(PC4)ELISA Kit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒
Iegrin Linked Kinase(ILK)ELISA Kit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA Kit
Iegrin Associated Protein(IAP)ELISA Kit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)試劑盒ELISA
Iegrin Beta 8(ITGb8)ELISA Kit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA檢測試劑盒
Iegrin Beta 7(ITGb7)ELISA Kit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒
Iegrin Beta 6(ITGb6)ELISA Kit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2(TRAIL-R2/DR5)試劑盒ELISA
Iegrin Beta 5(ITGb5)ELISA Kit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒
Iegrin Beta 4(ITGb4)ELISA Kit人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE) 試劑盒 ELISA
奧爾森派琴蟲PCR檢測試劑盒血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)重組蛋白Recombina Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)重組蛋白Recombina Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)
周期素依賴性激酶1(CDK1)重組蛋白Recombina Cyclin Depende Kinase 1 (CDK1)
周期素依賴性激酶2(CDK2)重組蛋白Recombina Cyclin Depende Kinase 2 (C?
化工儀器網(wǎng)