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小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞

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更新時間:2023-04-21 16:19:27瀏覽次數(shù):256

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 冠狀動脈
小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠頸動脈內(nèi)皮細胞原代細胞5×105小鼠頸動脈平滑肌細胞原代細胞5×105小鼠腹腔主動脈內(nèi)皮細胞原代細胞5×105小鼠腹腔主動脈平滑肌細胞原代細胞5×105小鼠腹腔主動脈外膜成纖維細胞原代細胞5×105

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

冠狀動脈

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。冠狀動脈內(nèi)皮細胞呈單層扁平分布,是一薄層的專門上皮細胞,它形成冠狀動脈的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至小的微血管。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內(nèi)皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

6號染色體開放閱讀框206抗體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨基肽1封閉多肽 

細胞凋亡敏感性基因抗體 6號染色體開放閱讀框142封閉多肽 

ATP依賴的解旋CHD6抗體 范可尼綜合征相關(guān)鋅指蛋白封閉多肽 

KMO蛋白抗體 鈣依賴膜結(jié)合蛋白Copine蛋白9封閉多肽 

英文名稱: Galectin 8 神經(jīng)細胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN5封閉多肽 

CD84抗體 轉(zhuǎn)錄增強因子TEF3封閉多肽 

纖維蛋白溶原抗體 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4封閉多肽 

結(jié)核分枝桿菌分泌性蛋白ESAT6抗體 Kartagener綜合征相關(guān)蛋白RSHL3封閉多肽 

磷化叉頭蛋白3A抗體 1號染色體開放閱讀框111封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 柯薩奇病毒A16型3CD封閉多肽 

B淋巴細胞成熟因子(CD269)抗體 前折疊蛋白亞基5封閉多肽 

膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白1抗體 細胞毒性受體NK-p44封閉多肽 

衰老標記蛋白30抗體 FBX47蛋白封閉多肽 

生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體 磷化蛋白激C zeta 封閉多肽 

TNRC18蛋白抗體 磷脂酰乙醇胺N-甲基轉(zhuǎn)移封閉多肽 

磷化220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體 AKT相互作用蛋白蛋白封閉多肽 

LHFP蛋白抗體 多聚免疫球蛋白受體封閉多肽 

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體 重組人促黃體生成受體蛋白 
小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞雞肺大動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL雞肺大動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持雞肺大動脈內(nèi)皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞肺大動脈內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞肺大動脈內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)。

NCI-H1975細胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H1975細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持NCI-H1975細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H1975細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H1975細胞的體外培養(yǎng)。

MDA-MB-435細胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4MDA-MB-435細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MDA-MB-435細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MDA-MB-435細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MDA-MB-435細胞的體外培養(yǎng)。

TE-10細胞專用培養(yǎng)基125mL×4TE-10細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持TE-10細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含TE-10細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于TE-10細胞的體外培養(yǎng)。

SK-N-SH細胞專用培養(yǎng)基125mL×4SK-N-SH細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SK-N-SH細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SK-N-SH細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SK-N-SH細胞的體外培養(yǎng)。

KHM-5M細胞專用培養(yǎng)基125mL×4KHM-5M細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持KHM-5M細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含KHM-5M細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于KHM-5M細胞的體外培養(yǎng)。

MEM(含NEAA、雙抗)500mL-


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