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小鼠虹膜色素上皮細胞

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更新時間:2023-04-23 10:41:36瀏覽次數(shù):239

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 眼球
小鼠虹膜色素上皮細胞的相關產品:HuTu-80 (人十二脂腸腺癌) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠脊髓成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶兔羊膜胚胎細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶CHL (倉鼠肺細胞)(種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶CCD-18Co (人結腸組織細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠虹膜色素上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

眼球

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自眼球虹膜組織;虹膜是眼睛構造的一部分,屬于眼球中層,位于血管膜的前部;在睫狀體前方虹膜,中心有一圓形開口,稱為瞳孔,猶如相機當中可調整大小的光圈,內含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強烈時,虹膜會收蹜,只使一小束光線穿透瞳孔,進入眼睛;當進入黑暗環(huán)境中,虹膜就會往后退縮,使瞳孔變大,讓更多的光線進入眼睛,多數(shù)的脊椎動物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細胞(IPE)是虹膜重要結構組成細胞之一,位于虹膜組織的后面,和視網膜色素上皮細胞(RPE)同樣起源于神經外胚葉層,可能具有相似的生物學功能,因此對IPE的研究將為防治因RPE結構或功能異常而導致的眼底病提供新思路。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

維甲調節(jié)核基質相關蛋白抗體 免疫球蛋白μ鏈結合蛋白2封閉多肽 

D型-天冬氨氧化抗體 S轉移ω2封閉多肽 

胰島受體相關受體抗體 蛋白激GCN2蛋白封閉多肽 

ZDHHC6蛋白抗體 中心體和紡錘體極相關蛋白1封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 7號染色體開放閱讀框29封閉多肽 

CD163蛋白樣1抗體 外致密纖維蛋白3B封閉多肽 

磷化γ1氨基丁受體GABAA Rβ1抗體 蛋白磷酯-1B封閉多肽 

LCMT2蛋白抗體 溶質載體轉運蛋白家族30成員5封閉多肽 

磷肌醇磷蛋白INPP5抗體 溶質載體家族蛋白30成員A9封閉多肽 

CD244抗體 羥基酰水解樣蛋白封閉多肽 

CD351抗體 21號染色體開放閱讀框7封閉多肽 

延伸因子EF-1δ抗體 活化半胱胺蛋白-3封閉多肽 

親環(huán)蛋白(親環(huán))40抗體 紡錘體組裝異常蛋白6封閉多肽 

甲基化樣蛋白21B抗體 G蛋白偶聯(lián)受體128封閉多肽 

CD44抗體 磷化細胞信號轉導分子SMAD2封閉多肽 

MEGF9蛋白抗體 精子卵子結合生成堿性螺旋蛋白2封閉多肽 

磷化鈉鉀ATP蛋白a1抗體 凋亡抑制因子1封閉多肽 

外周蛋白單克隆抗體 Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1封閉多肽 
小鼠虹膜色素上皮細胞人皮層神經元細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

DC2.4 (小鼠骨髓來源樹突狀細胞) (種屬鑒定正確) RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

K-562 [K562] (人慢性髓原白血病細胞) (STR鑒定正確)IMDM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠主動脈外膜成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

VCaP (人前列腺癌細胞) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

RG2 [D74] (大鼠膠質瘤細胞) (種屬鑒定正確)DMEM+10%FBS+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

人乳腺癌組織源細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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