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人胰腺癌組織源星狀細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:00:57瀏覽次數(shù):257

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 胰腺癌組織
人胰腺癌組織源星狀細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:AE-2 (小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗AChE))(種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠腹膜間皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠腦微血管周細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶NCTC 1469 (小鼠正常肝細(xì)胞) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H838 (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

人胰腺癌組織源星狀細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胰腺癌組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自患有胰腺癌病人的胰腺癌組織;胰腺癌是一種惡性程 度很高,診斷和治療都很困難的消化道惡性腫瘤,約90%為起源于腺管上皮的導(dǎo)管腺癌。其發(fā)病率和死亡率近年來(lái)明顯上升。5年生存率<1%,是預(yù)后差的惡性腫瘤之一。胰腺癌早期的確診率不高,手術(shù)死亡率較高,發(fā)揮重要的作用。因此針對(duì)胰腺星狀細(xì)胞和胰腺癌細(xì)胞相互作用的研究有望提高胰腺癌患者的預(yù)后。胰腺星狀細(xì)胞(pancreaticstellate cells , PSC)是一種胰腺特異性間質(zhì)細(xì)胞,多在胰腺組織內(nèi)血管和導(dǎo)管周圍聚集,環(huán)繞在腺泡的基底部位,正常靜比狀態(tài)下只占胰腺細(xì)胞的4%左右,細(xì)胞質(zhì)中含有豐富的維生素A脂滴,以表達(dá)膠質(zhì)纖絲suan性蛋白質(zhì)(glial filament acidic protein , GFAP )、結(jié)合蛋白(Desmin)為特征。在胰腺組織損傷、應(yīng)激等條件下PSC被激活,成為一種肌成纖維細(xì)胞,胞質(zhì)中富含維生素A的脂滴消失,以表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin , α-SMA)為標(biāo)志,能大量合成細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix , ECM)和分泌多種細(xì)胞因子。胰腺癌微環(huán)境中存在大量激活的PSC,在胰腺癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。PSC通過(guò)誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞(pancreatic cancercells , PCC)上皮一間質(zhì)轉(zhuǎn)變(epithelial-mesenchymaltransition , EMT)促進(jìn)胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移侵襲和轉(zhuǎn)移是腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)腫瘤灶到達(dá)靶器官的一個(gè)多步驟過(guò)程,眾多研究表明EMT與胰腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。EMT主要的特征是上皮細(xì)胞特征丟失同時(shí)伴間質(zhì)細(xì)胞特征獲得,如E一鈣茹蛋白(E-cadherin)表達(dá)下降,波形蛋白(Vimentin)表達(dá)上調(diào)。karnevi等研究發(fā)現(xiàn),PSC與PCC共培養(yǎng)后能夠誘導(dǎo)PCC上皮性細(xì)胞標(biāo)志(E-cadherin , β-catenin)丟失,促進(jìn)間質(zhì)性細(xì)胞標(biāo)志(Vimentin,Snai-1)獲得,表明PSC在PCC的EMT形成過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用。PSC參與胰腺癌進(jìn)展的各個(gè)環(huán)節(jié),而PSC活化是PSC發(fā)揮功能的重要部分。因此,如能抑制PSC活化或控制PSC細(xì)胞功能將為胰腺癌療提供潛在的治療策略。因此,隨著針對(duì)抑制PSC活化或其功能的研究的深入,有望從胰腺癌微環(huán)境角度切實(shí)提高胰腺癌效果。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

單鏈DNA結(jié)合蛋白2抗體 富含精氨/絲氨剪切因子11封閉多肽 

ATP-依賴的RNA解旋30抗體 開(kāi)關(guān)相關(guān)蛋白70封閉多肽 

細(xì)胞色P450 F2抗體 精子相關(guān)蛋白AKAP封閉多肽 

Muellerian繆勒管激抑制因子單克隆抗體 細(xì)胞內(nèi)流鉀通道蛋白Kir5.1封閉多肽 

英文名稱: CPN10 hUPF2蛋白封閉多肽 

絲氨抑制劑B3抗體 羧肽CPO封閉多肽 

磷化電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2抗體 RSPRY1蛋白封閉多肽 

堿性亮氨拉鏈蛋白BZW1抗體 P2Y4受體封閉多肽 

多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽 

脫氧輔合蛋白抗體 霍亂腸毒β鏈封閉多肽 

干擾α-1b/IFN a1b抗體 卵黃樣羧肽封閉多肽 

睪丸特異性核苷果糖β抗體 FAM196B蛋白封閉多肽 

細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白1抗體 血管生成相關(guān)蛋白5封閉多肽 

磷化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體 RALGPS1蛋白封閉多肽 

胰島樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2抗體 gasdermin蛋白封閉多肽 

肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白FIG4抗體 去泛化22封閉多肽 

鳥(niǎo)苷激GMK抗體 FAM124B蛋白封閉多肽 

陽(yáng)離子通道精子相關(guān)蛋白4抗體 G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB6A封閉多肽 
人胰腺癌組織源星狀細(xì)胞小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

COS-7細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4COS-7細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持COS-7細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含COS-7細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于COS-7細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠NG2細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠NG2細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠NG2細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠NG2細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠NG2細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人牙齦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人牙齦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人牙齦成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人牙齦成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人牙齦成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

MEM(ATCC改良)500mL-

小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM高糖(含HEPES,不含鈉)500mL-


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