詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:羊痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Capripox VirusPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
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Rat Immunoglobulin E, IgE Elisa Kit 蛋白精氨suan甲基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒 PRMT1免費(fèi)代測(cè)試劑
Rat Immunoglobulin G, IgG Elisa Kit 蛋白精氨suan脫亞氨酶4ELISA試劑盒 PADI4免費(fèi)代測(cè)試劑
Rat Immunoglobulin M, IgM Elisa Kit 蛋白聚糖3ELISA試劑盒 PRG3免費(fèi)代測(cè)試劑
Rat Endostatin, ES Elisa Kit蛋白酪氨suan激酶2βELISA試劑盒 PTK2β免費(fèi)代測(cè)試劑
Rat brain natriuretic peptide, BNP Elisa Kit蛋白酪氨suan激酶ELISA試劑盒 PTK免費(fèi)代測(cè)試劑
Rat Prostaglandin E2, PG-E2 Elisa Kit蛋白酪氨suan磷suan酶1BELISA試劑盒 PTP1B免費(fèi)代測(cè)試劑
Rat Neuron-specific enolase, NSE Elisa Kit蛋白酪氨suan磷suan酶ⅣA3ELISA試劑盒 PTPⅣA3免費(fèi)代測(cè)試劑
Rat iercellular adhesion molecule 2, ICAM-2 Elisa Kit蛋白酪氨suan磷suan酶ELISA試劑盒 PTP/PTPase/CD148免費(fèi)代測(cè)試劑
Rat iercellular adhesion molecule 3, ICAM-3 Elisa Kit蛋白酪氨suan磷suan酶受體BELISA試劑盒 PTPRB免費(fèi)代測(cè)試劑
Rat plasminogen activator inhibitor 1, PAI-1 Elisa Kit 蛋白酪氨suan磷suan酶受體GELISA試劑盒 PTPRG免費(fèi)代測(cè)試劑
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海藻糖合成酶(TS)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣
海藻糖合成酶(TS)測(cè)試盒/微量法100管/48樣
海藻糖酶(THL)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣
海藻糖酶(THL)測(cè)試盒/微量法100管/48樣