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小鼠肺泡巨噬細胞

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更新時間:2023-04-23 10:20:19瀏覽次數(shù):282

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺組織
小鼠肺泡巨噬細胞的相關(guān)產(chǎn)品:人腸微血管內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶A7r5 (大鼠胸大動脈平滑肌細胞) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠胰島細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H23 (人非小細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶TC-1 (小鼠肺上皮細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肺泡巨噬細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細胞,而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應(yīng)。肺泡巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細胞儲存器官,為結(jié)核病的研究提供了重要的材料。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用機械研磨結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  巨噬細胞樣

傳代特性  屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液  (12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

NBPF11蛋白抗體 線粒體核糖核P蛋白3封閉多肽 

FAM190B蛋白抗體 鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1封閉多肽 

英文名稱: alpha smooth muscle Actin GRWD1蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白839抗體 核糖體RNA合成蛋白42封閉多肽 

高遷移率族蛋白A1抗體 促血管平滑肌細胞分化因子封閉多肽 

RAP2C蛋白抗體 磷化補體成分5受體1封閉多肽 

卵磷酯?;D(zhuǎn)移抗體 PRTG蛋白封閉多肽 

富含亮氨重復(fù)蛋白24抗體 鋅指蛋白ZIC5封閉多肽 

原肌球蛋白4抗體 4號染色體開放閱讀框27封閉多肽 

中心體蛋白192抗體 組織相容性復(fù)合體蛋白1封閉多肽 

雞新城疫血凝抗體 金屬組織抑制因子-2封閉多肽 

F-box蛋白相關(guān)蛋白36抗體 重組人周期D1蛋白 

FAM49B蛋白抗體 視黃受體應(yīng)答蛋白1封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體8抗體 上皮細胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2封閉多肽 

L選擇抗體 磷化gp130封閉多肽 

多巴胺受體相互作用蛋白1抗體 22號染色體開放閱讀框29封閉多肽 

磷化組蛋白去乙?;?/span>8抗體 ZMYND17蛋白封閉多肽 

RTDR1蛋白抗體 蛋白磷PPP1R11封閉多肽 
小鼠肺泡巨噬細胞人主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL人主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人主動脈平滑肌細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人主動脈平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人主動脈平滑肌細胞的體外培養(yǎng)。

LLC-MK2細胞專用培養(yǎng)基125mL×4LLC-MK2細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持LLC-MK2細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含LLC-MK2細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于LLC-MK2細胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖 (不含酚紅、L-、鈉,含HEPES)500mL-

小鼠脂肪干細胞培養(yǎng)基100mL小鼠脂肪干細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠脂肪干細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠脂肪干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠脂肪干細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基100mL小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)基100mL大鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠肺泡巨噬細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠肺泡巨噬細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肺泡巨噬細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)。

 


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