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人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 09:35:20瀏覽次數(shù):243

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 冠狀動脈
人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:細(xì)胞消化液細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100mL細(xì)胞消化液細(xì)胞培養(yǎng)添加劑500mL復(fù)蘇專用因子細(xì)胞培養(yǎng)添加劑1mg基質(zhì)膠細(xì)胞培養(yǎng)添加劑5 mLES細(xì)胞專用凍存液細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100mL

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

冠狀動脈

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布,是一薄層的專門上皮細(xì)胞,它形成冠狀動脈的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至小的微血管。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

FAM58A蛋白抗體 鈣結(jié)合蛋白1封閉多肽 

內(nèi)皮受體A抗體 重組人脂聯(lián)蛋白 

腦指蛋白179抗體 熱休克蛋白27/HSP25封閉多肽 

P2Y4受體抗體 黑色瘤相關(guān)抗原E1封閉多肽 

多囊腎蛋白1抗體 重組人轉(zhuǎn)移生長因子β受體2蛋白 

鈣粘附蛋白-11抗體 FCRLB蛋白封閉多肽 

同源轉(zhuǎn)錄因子DLX6抗體 Hermansky-Pudlak綜合征蛋白5封閉多肽 

微管相關(guān)蛋白1S抗體 肝黃單加氧2封閉多肽 

血型糖蛋白δ抗體 甲狀腺結(jié)合球蛋白封閉多肽 

ATP6V0D2蛋白抗體 神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2/NINJ2封閉多肽 

小腦肽4抗體 伴侶蛋白9封閉多肽 

磷化生肌決定因子Myf5抗體 MSL1蛋白封閉多肽 

糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域2/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移2抗體 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白12封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體105抗體 溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運蛋白家族35成員F1封閉多肽 

鉀離子通道蛋白家族KCNQ2抗體 重組2 Spike突變蛋白RBD(Y449H, E484K, N501Y) 

基質(zhì)細(xì)胞衍生生長因子SF20抗體 腦啡肽受體/ζ受體封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框171抗體 細(xì)胞色C氧化17封閉多肽 

天冬氨家族蛋白抗體 同源盒蛋白HOXA11封閉多肽 
人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠卵巢成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠卵巢成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠卵巢成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MDA-MB-435細(xì)胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4MDA-MB-435細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MDA-MB-435細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MDA-MB-435細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MDA-MB-435細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

McCoy's 5A(含L-丙氨酰-L-、HEPES)500mL-

ACHN細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4ACHN細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持ACHN細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含ACHN細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于ACHN細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

HIC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HIC細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HIC細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HIC細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HIC細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

McCoy's 5A培養(yǎng)基(含HEPES、20%FBS)125mL×4McCoy's 5A培養(yǎng)基是Thomas McCoy等人在1959年設(shè)計的培養(yǎng)基,初專門用于Novikoff Hepatoma細(xì)胞的培養(yǎng)。McCoy's 5A培養(yǎng)基是改良的Basal Medium 5A,與其他培養(yǎng)基不同的是,McCoy's 5A含有還原型、細(xì)菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖。McCoy's 5A廣泛用于多種類型的原代細(xì)胞的培養(yǎng),如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網(wǎng)膜等。此外McCoy's 5A培養(yǎng)基還用于組織活檢培養(yǎng)、細(xì)胞建系,以及一些淋巴細(xì)胞和較難培養(yǎng)的細(xì)胞的培養(yǎng)。

大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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