詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:棕蜱通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Rhipicephalus spp.PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
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Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 5(PCSK5)ELISA Kit腺苷suan激酶4ELISA試劑盒 AK4免費代測試劑
Preprooxytocin(OT)ELISA Kit腺苷suan激酶5ELISA試劑盒 AK5免費代測試劑
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Pre-B-Lymphocyte Gene 1(VPREB1)ELISA Kit腺苷suan激酶8ELISA試劑盒 AK8免費代測試劑
Dysferlin(DYSF)ELISA Kit腺苷脫氨酶ELISA試劑盒 ADA免費代測試劑
Pleckstrin Homology Like Domain Family A, Member 2(PHLDA2)ELISA Kit腺瘤息肉病大腸桿菌蛋白ELISA試劑盒 APC免費代測試劑
Pleckstrin 2(PLEK2)ELISA Kit腺嘌呤核苷suan轉(zhuǎn)運蛋白ELISA試劑盒 A免費代測試劑
Pleckstrin(PLEK)ELISA Kit腺嘌呤磷suan核糖轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 APRT免費代測試劑
Glucose Transporter 9(GLUT9)ELISA Kit腺相關(guān)病毒ELISA試劑盒 AAV免費代測試劑
棕蜱通用PCR檢測試劑盒血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)重組蛋白Recombina A Disiegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 5 (ADAMTS5)
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解整合素金屬19(ADAM19)重組蛋白Recombina A Disiegrin And?