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詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱：原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系
產(chǎn)品規(guī)格：100ml/500ml
貨號(hào)：BJ-01X1970
保存溫度（℃）：2-8℃/-20℃
運(yùn)輸溫度（℃）：2-8℃/-20℃
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，*進(jìn)口來(lái)源，*保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
豬二肽肽X (DPP10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 1-乙-3-（3-二氨）碳二亞鹽鹽氧化釤 99.99% metals basis對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：
豬補(bǔ)體因子I(CFI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒酚酞單磷環(huán)己鹽氧化釤 40nm 球形，99.5%水質(zhì)亞硝鹽標(biāo)樣 1.20mg/L，分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬叉頭框蛋白P3(FOXP3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒酚酞單磷環(huán)己鹽氧化銩 99.9% metals basis濃度范圍:0.421-3.32(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬ras同源物因家族成員a(RHOA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒苯酰鋱粉 99.9% metals basis濃度范圍:1.21-3.58(mg/L)，分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬核孔蛋白160kda(NUP160)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒苯酰鋱 99.99%水質(zhì)氮氧化物（水劑）標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子1(TAF1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聯(lián)苯銩片 99.9% (REO)對(duì)硝苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑：
豬前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合1(PTGS1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒乙二鹽鹽氧化鐿 99.9% metals basis硝鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,不確定度2%
豬間隙連接蛋白26(CX26)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 乙二鹽鹽硫化鋅 4N，靶材水質(zhì)總有機(jī)碳標(biāo)樣 濃度范圍:（24.4±1.5）mg/l分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬角蛋白17(CK17/KRT17)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 乙酰硫化鋅 99.99% metals basis,3.8-4.2μm,powder中有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)樣分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬跨膜絲氨蛋白2(TMPRSS2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒乙酰2-氟-5- 98%中有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬Pirin蛋白(PIR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒乙酰乙酰苯七氟丁 蛋白質(zhì)測(cè)序分析,99%五苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液776mg/L,溶劑:
豬抗糖蛋白抗體(GP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 N-苯酰-N-苯羥離子對(duì)PIC，用于LC-MS，0.5mol/L 水溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液1.35-4.29mg/L,水質(zhì)分析用
豬凝血因子Ⅶ(F7)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 N-苯酰-N-苯羥七氟丁 離子色譜級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：水
豬末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-乙酰苯七氟丁 98%間酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：
豬纖維蛋白肽B(FPB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-乙酰苯全氟丁磺 97%對(duì)硫標(biāo)準(zhǔn)溶液 500μg/ml，溶劑：
豬中性粒激活蛋白3(NAP3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒碳環(huán)己硫鈰,四水 AR，98%中對(duì)標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品
原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系高度發(fā)散同源異型盒蛋白抗體1,7-雙苯-5-羥-6-庚烯-3- Z-Thr-OH
腺病六鄰體蛋白抗體1,8-桉葉素 Z-β-Ala-OH
高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體1-羥-3,4,5-三氧山（標(biāo)準(zhǔn)品） Z-Glu-OBzl
轉(zhuǎn)錄因子HNF-3α抗體10-姜酚（標(biāo)準(zhǔn)品） Z-Tyr-OH
熱休克蛋白β7抗體10-羥癸（標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Tyr-OMe
E3連接抑制素受體2抗體10-羥癸烯,10-HDA(標(biāo)準(zhǔn)品) Amoxicillin sodium
透明質(zhì)及粘蛋白3抗體10-羥喜樹(標(biāo)準(zhǔn)品) N-Cbz-D-valine
22號(hào)染色體開放閱讀框28抗體10-脫乙酰巴卡亭(標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Arg(Mtr)-OH·CHA
14號(hào)染色體開放閱讀框94抗體11(α)氧柴胡皂苷F H-Lys(Z)-OMe hydrochloride
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